CARMA3基因敲减对结肠癌细胞HCT116生长和侵袭转移的抑制

• 作者: 刘枋 叶韵斌 林万松 陈淑萍
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CARMA3 结肠癌 慢病毒 细胞生长 细胞迁移 细胞侵袭
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1021-1030
• 页数: 10页
• 分类号: R730.23|R735.3
• 字数: 5550字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.06.011

摘要

目的:探讨CARMA3基因在人结肠癌细胞HCT116生长和侵袭转移中的作用及其机制.方法:选取高表达CARMA3的人结肠癌细胞株.应用慢病毒技术敲减CARMA3基因,puromycin筛选后构建稳定转染的HCT116-shCARMA3细胞株.Real-time PCR和Western blot鉴定 mRNA和蛋白表达的抑制情况.WST-1法和RTCA S16系统分析细胞增殖情况.集落形成实验观察集落形成.流式细胞术检测细胞周期.显微镜下观察上皮-间充质转化(EMT)形态变化.划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力的改变.Western blot分析相关分子变化,探讨可能机制.结果:4株人结肠癌细胞株中HCT116细胞的CARMA3 mRNA和蛋白表达量最高,构建稳定沉默CARMA3的HCT116-shCARMA3细胞株,其中HCT116-shCARMA3-93细胞中CARMA3 的mRNA和蛋白受抑制最明显,将其作为细胞模型.相比于对照组,HCT116-shCARMA3-93细胞形态发生EMT逆转,其增殖、集落形成、迁移和侵袭能力明显下降(P<0.01).HCT116-shCARMA3-93的G0/G1细胞所占比例明显升高,S期细胞比例相应下降(P<0.05).信号通路分子Bcl10和NF-κB表达明显下调,MALT-1变化不明显;细胞周期相关蛋白cyclin D1显著下调,cyclin A表达略有下降;侵袭转移相关分子MMP-2和MMP-9的表达下调,MMP-7未见改变,TIMP-1和TIMP-2的表达上调;EMT相关分子E-cadherin的表达水平升高,N-cadherin、Snail、Slug和Twist的表达水平呈不同程度降低.结论:CARMA3可通过改变细胞周期和侵袭转移分子的表达、调控EMT来影响结肠癌细胞HCT116的生长和侵袭转移.这可能与NF-κB信号通路发生改变有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈淑萍	福建省肿瘤医院福建医科大学附属肿瘤医院肿瘤免疫学研究室	11	45	5.0	6.0
5	刘枋	福建省肿瘤医院福建医科大学附属肿瘤医院肿瘤免疫学研究室	8	20	3.0	4.0
9	林万松	福建省肿瘤医院福建医科大学附属肿瘤医院肿瘤免疫学研究室	1	1	1.0	1.0