双点突变对猪链球菌2型溶血素活性的影响

• 作者: 刘爽 孙学强 宫枫举 张兴进 张秀娟 潘子豪 马喆
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 猪链球菌2型 溶血素 突变 溶血活性 细胞毒性
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 87-91
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+9.5
• 字数: 4551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.09.024

摘要

猪链球菌2型作为一种人兽共患病病原,日益受到关注.而溶血素是其分泌的外毒素,是公认的重要毒力因子之一,具有良好的免疫原性.本试验通过PCR方法获得猪链球菌2型野生型溶血素基因sly和463、464双点突变的溶血素突变体基因slym.将sly和slym克隆至表达载体,构建了2个重组载体并在大肠杆菌中表达了野生型溶血素rSLY和突变型溶血素rSLYm.经过蛋白杂交试验,证明表达的rSLY和rSLYm与提取的猪链球菌的天然野生型SLY分子量完全一致.以提取的野生型SLY为对照,通过溶血试验证明,突变型溶血素rSLYm失去了溶血活性;通过接种PK15、RK13、SUVEC细胞单层,证明突变型溶血素rSLYm失去细胞毒性;通过小鼠试验,证明突变型SLYm对小鼠没有毒力.本试验通过溶血试验、细胞接种和小鼠实验,证明双点突变灭活了野生型溶血素的溶血活性、细胞毒性和小鼠毒力.该溶血素突变体经免疫实验证实后,可作为猪链球菌2型亚单位疫苗的候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘爽		30	181	7.0	13.0
2	张秀娟		12	38	4.0	6.0
3	张兴进		4	2	1.0	1.0
4	宫枫举		5	4	1.0	1.0
5	潘子豪		12	33	4.0	5.0
6	马喆		6	5	1.0	2.0