线粒体自噬对新生大鼠缺氧缺血脑损伤的影响

• 作者: 屈艺 李明熹 母得志
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 关键词: 线粒体自噬 缺氧缺血脑损伤 新生大鼠
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著?实验研究
• 页码范围: 242-249
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7499/j.issn.1008-8830.2017.02.021

摘要

目的：了解缺氧缺血脑损伤的动物模型中线粒体自噬情况，探讨其在缺氧缺血脑损伤中的作用。方法将120只新生7日龄Sprague-Dawley大鼠分为假手术组、缺氧缺血脑损伤（HIBD）组、自噬抑制剂干预组（3MA组）。HIBD组行右侧颈总动脉结扎后置于低氧仓（8%氧气和92%氮气）2.5 h，3MA组腹腔注射2μL 3MA 30 min后再进行结扎和低氧处理，假手术组不予结扎和低氧处理。在造模后提取各组单细胞悬液，用Mitotracker标记线粒体、Lysotracker标记自噬小体、LC3标记自噬进行免疫荧光共定位观察线粒体自噬情况；荧光探针JC-1染色后，采用流式细胞仪检测线粒体膜电位。TTC染色法检测脑梗死灶大小。提取皮质神经元中的细胞浆蛋白，Western blot法检测线粒体自噬相关蛋白的表达情况。结果与假手术组相比，HIBD组线粒体膜电位明显降低（P<0.05），线粒体自噬增加（P<0.05），线粒体分裂相关蛋白Drp1、Fis1的表达升高，线粒体外膜蛋白受体Tom20与内膜蛋白受体Tim23的表达降低（P<0.05）；3MA组膜电位比HIBD组降低更为明显（P<0.05），但线粒体自噬程度明显减少（P<0.05）。3MA组大鼠脑组织梗死程度较HIBD组明显增加（P<0.05）。结论 HIBD能够增加线粒体自噬的发生，抑制线粒体自噬会加重新生大鼠HIBD的损伤程度。