牦牛溶菌酶的定向进化研究

• 作者: 张林 江明锋 覃佳 马仲元
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 牦牛 溶菌酶 DNA洗牌技术 定向进化 基因重组 真核表达
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 34-38,42
• 页数: 6页
• 分类号: S823.8+5|Q786
• 语种: 中文

摘要

为了通过定向进化的方法提高牦牛溶菌酶的活性,试验选用3个牦牛基因YSL1a、YSL3c和YML,通过DNA洗牌技术进行序列重组以及酶活筛选,获得了一个重组基因HYL,检测其酶活,构建重组子基因HYL的真核表达载体,转化毕赤酵母X33,并对重组HYL溶菌酶的活性进行检测.结果表明:HYL与YSL1a、YSL3c和YML的序列相似性分别为85.36％、96.04％和83.11％,突变核苷酸分别为65,17,75个;重组序列与3个亲本基因相比均有序列缺失.筛选到一个酶活达667.72 U/mg的阳性克隆,其活性高于亲本基因中YSL3c真核表达产物.说明本试验中牦牛HYL的序列发生了序列重组,而且其真核表达产物具有活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江明锋		35	283	6.0	16.0
2	张林		6	28	3.0	5.0
3	覃佳		1	0	0.0	0.0
4	马仲元		1	0	0.0	0.0