一株强裂解性大肠杆菌T1样噬菌体新成员的分离与鉴定

• 作者: 严亚贤 傅强 单文雅 孙建和 李世雨 王兆飞 王恒安
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 大肠杆菌 T1样噬菌体 生物学特性 基因组分析
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 病原分离与鉴定
• 页码范围: 2782-2794
• 页数: 13页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.170514

摘要

[目的]自然界中噬菌体种类繁多,其裂菌功能在针对细菌耐药方面具有潜在应用价值.不同噬菌体也呈现出显著的基因多样性及宿主特异性.从上海某猪场仔猪肠内容物样品中分离、纯化大肠杆菌的裂解性噬菌体,分析其生物学特性和病毒学特征,为探索应用噬菌体治疗细菌性感染提供研究材料.[方法]采用双层琼脂平板法分离、纯化噬菌体,观察噬菌斑特征,通过电镜观察噬菌体形态特征,测定其裂菌谱、最佳感染复数、一步生长曲线和生物学特性,进行噬菌体全基因组测序和遗传进化分析.[结果]分离、纯化获得一株能高效裂解大肠杆菌K-12菌株的噬菌体,命名为vB_EcoS_SH2 (SH2),噬菌斑呈圆形、大而透明、边缘整齐.电镜观察SH2的头部呈二十面体立体对称,尾部较长.噬菌体的潜伏期为10 min,暴发期为60 min,裂解量高达121 PFU/感染细胞,其最佳感染复数为0.1.基因组测序和比对结果表明,SH2的核酸类型为dsDNA,基因组全长为49 088 bp,G+C％含量为45％,GenBank登录号为KY985004,结合电镜观察及BLASTp分析,确定其属于有尾噬菌体目长尾噬茵体科成员.同源性及进化分析表明,该噬菌体为大肠杆菌T1样噬菌体的新成员.[结论]分离鉴定了一株裂解效率极高的大肠杆菌T1样噬菌体,并确认其为T1样噬菌体新成员,为研究大肠杆菌噬菌体及其抗菌应用提供了新的实验材料.