长时间不同强度负压对兔BMSCs成骨分化及增殖的影响研究

• 作者: 吴向未 张宏伟 彭心宇 徐强 李伯龙 葛权虎 赵伯文
• 来源期刊: 中国修复重建外科杂志
• 关键词: BMSCs 负压 成骨分化 细胞增殖 兔
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 干细胞与组织工程
• 页码范围: 594-599
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7507/1002-1892.201701095

摘要

目的 探讨长时间不同强度负压对兔BMSCs成骨分化及增殖的影响.方法 取4～6月龄新西兰大白兔股骨骨髓,采用密度梯度离心法分离培养BMSCs,并行流式细胞术及成骨诱导鉴定.取第3代细胞采用成骨诱导培养基诱导培养,并加载不同强度负压,分别为0、75、150 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)(对照组、低负压组、高负压组);负压时间为30 min/h.倒置显微镜下观察细胞生长状态,绘制细胞生长曲线;诱导3、7、14d采用ELISA法检测细胞ALP活性,14d采用实时荧光定量PCR及Western blot检测各组Ⅰ型胶原、骨钙素(osteocalcin,OC)基因及蛋白表达.结果 经流式细胞仪及成骨诱导鉴定所培养细胞为BMSCs;第3代BMSCs为典型的长梭形和不规则形.诱导4d,高负压组细胞显著少于对照组及低负压组(P＜0.05),低负压组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);5～7d3组间细胞数比较差异均有统计学意义(P＜0.05),负压越大细胞增殖受抑制越明显.ALP活性检测示,诱导3d各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);7d,仅高负压组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);14 d,3组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05),负压越大ALP活性越高.实时荧光定量PCR及Western blot检测示,低负压组及高负压组Ⅰ型胶原和OC mRNA及蛋白表达量均显著高于对照组,高负压组高于低负压组,比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 随负压增高,兔BMSCs成骨能力逐渐增强,而细胞增殖能力逐渐受抑制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭心宇		87	424	10.0	17.0
2	张宏伟		27	56	6.0	7.0
3	吴向未		60	211	9.0	12.0
4	李伯龙		5	7	2.0	2.0
5	赵伯文		6	9	2.0	3.0
6	徐强		5	2	1.0	1.0
7	葛权虎		3	9	2.0	3.0