乙二醇联合丙二醇用于猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究

• 作者: 吴国权 张斌 权国波 洪琼花 相德才 邵庆勇
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 猪卵母细胞 玻璃化冷冻 渗透性冷冻保护剂 温度 预平衡
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 繁殖生理
• 页码范围: 47-50
• 页数: 4页
• 分类号: S828.3
• 字数: 3381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19556/j.0258-7033.2017-08-047

摘要

本实验以猪GV期卵母细胞为模型,旨在研究乙二醇(EG)联合丙二醇(PROH)作为渗透性冷冻保护剂的冷冻保存方案.将卵母细胞在室温(25℃)和生理温度(39℃)2种冷冻操作条件下,采用2.5％EG+2.5％ PROH直接处理10 min(预平衡方式Ⅰ)或分步以3.75％ EG+ 3.75％ PROH、7.5％ EG+ 7.5％ PROH 2种溶液各处理2.5 min(预平衡方式Ⅱ)进行预平衡,然后Cryotop法玻璃化冷冻保存,解冻后分析其存活、体外成熟及孤雌发育能力.结果表明:在2种温度下,顸平衡方式Ⅰ组卵母细胞解冻后2h的存活率均显著高于预平衡方式Ⅱ组(P＜0.05),但存活卵母细胞成熟培养后,在各冷冻组间的存活率无明显差异(P＞0.05);冷冻组卵母细胞的核成熟也与新鲜卵母细胞无显著性差异(P＞0.05);在相同温度下,预平衡方式Ⅰ组的卵裂率和囊胚发育率均显著高于预平衡方式Ⅱ组(P＜0.05);当采用同一预平衡方式时,39℃的冷冻操作条件所获卵裂率和囊胚发育率显著低于25℃(P＜0.05);此外,各组间囊胚细胞数均无明显差异(P＞0.05).综上所述,EG联合PROH用于猪GV期卵母细胞的Cryotop法玻璃化冷冻保存时,25℃冷冻操作条件下,采用预平衡方式Ⅰ可获得较高的冷冻存活率及囊胚发育率.