人MutS同源蛋白2(hMSH2)过表达的肺癌细胞模型的构建

• 作者: 代玉梅 何维 李娟 李文利 沈青丽 陆必超 陈慧
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 人MutS同源蛋白2 γδ T细胞 NCI-H520细胞
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 929-934
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2810字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人MutS同源蛋白2(hMSH2)过表达的肺癌细胞模型,探究hMSH2分子介导γδ T细胞杀伤肺癌细胞的效应.方法 PCR扩增hMSH2编码序列,同源重组法构建hMSH2-EGFP融合蛋白过表达载体;转染肺癌细胞系NCI-H520细胞以构建hMSH2分子过表达的NCI-H520细胞模型;Western blot检测细胞中hMSH2分子表达,流式细胞计量术检测细胞膜上hMSH2分子表达,体外扩增人外周血单个核细胞中的γδ T细胞,乳酸脱氢酶释放法检测γδ T细胞对过表达hMSH2的NCI-H520细胞的杀伤效率.结果 获得hMSH2编码序列(2 805 bp),构建Fugw-hMSH2重组载体,酶切鉴定结果与预期目的条带大小相符;hMSH2-EGFP融合蛋白在NCI-H520细胞中得到表达,过表达hMSH2的NCI-H520细胞表面的hMSH2分子水平显著升高(P＜0.001);yδ T细胞对过表达hMSH2的NCI-H520细胞的杀伤效率较野生型NCI-H520细胞显著升高(P＜0.05).结论 成功构建hMSH2分子过表达的肺癌细胞模型;细胞膜上表达水平上调的hMSH2分子增强了γδ T细胞对肺癌细胞的细胞毒作用.