miR-23a和ESRP1在直肠癌中的作用

• 作者: 劳玲娟 宋新江 徐佳
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 直肠癌 miR-23a 上皮剪接调节蛋白1 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 817-825
• 页数: 9页
• 分类号: R363|R735.3+7
• 字数: 6363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.05.009

摘要

目的:研究miR-23a和上皮剪接调节蛋白1(epithelial splicing regulatory protein 1,ESRP1)在直肠癌组织及细胞系中的表达,以及对体外直肠癌细胞活力和凋亡的作用.方法:采用RT-qPCR分析miR-23a在36例直肠癌组织和癌旁组织中的表达,免疫组化检测ESRP1在直肠癌组织中的表达,分析miR-23a和ESRPl在直肠癌组织中的相关性;利用RT-qPCR检测miR-23a在直肠癌Caco-2和SW480细胞及人正常结肠上皮细胞株NCM460中的表达;合成miR-23a inhibitor和inhibitor 阴性对照 (inhibitor NC),并将其分别转染至SW480细胞后,通过CCK-8法检测miR-23a inhibitor转染SW480细胞后对细胞活力的影响,流式细胞术检测转染后细胞凋亡率,Transwell小室实验检测细胞侵袭;通过Western blot技术检测SW480细胞中ESRPl蛋白的表达;构建野生型pGL3-ESRP1-3'UTR(wt-pGL3-ESRP1-3'UTR)或突变型pGL3-ESRP1-3'UTR(mut-pGL3-ESRP1-3'UTR)质粒,并分别与miR-23a inhibitor或inhibitor NC共转染至HEK293和SW480细胞中,利用双萤光素酶报告基因检测试剂盒说明检测双萤光素酶活性;将ESRP1 mimic或mimic NC瞬时转染SW480细胞后,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡;Western blot法检测瞬转ESRP1 mimic后对ESRP1、caspase-3、Smac和XIAP蛋白表达的影响.结果:miR-23a和ESRP1在直肠癌组织的表达较癌旁正常组织分别上调和下调,两者呈明显负相关(P<0.01);miR-23a的表达与直肠癌的淋巴结转移和肿瘤浸润深度相关;与NCM460细胞相比较,miR-23a在SW480细胞中的表达量显著上调(P<0.01);转染miR-23a inhibitor后,SW480细胞活力较inhibitor NC组显著下降(P<0.01);转染miR-23a inhibitor后SW480细胞早期凋亡率明显升高,同时细胞体外侵袭能力受到抑制;萤光素酶报告基因结果表明ESRP1是miR-23a的直接靶基因;转染miR-23a inhibitor至SW480细胞后ESRP1蛋白表达水平明显升高;ESRP1 mimic转染SW480细胞后可抑制细胞活力并诱导细胞凋亡,同时上调caspase-3和Smac的表达,下调XIAP的表达.结论:miR-23a可通过负向调控下游靶基因ESRP1从而影响直肠癌细胞生长和凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	劳玲娟	绍兴第二医院肛肠外科	5	14	2.0	3.0
2	宋新江	绍兴第二医院肛肠外科	14	73	5.0	8.0
3	徐佳	岳阳市一人民医院胃肠外科	4	5	1.0	2.0