摘要:
目的 研究阿托伐他汀在炎症状态下对人肝癌细胞株HepG2细胞氧化应激和脂质积聚的影响.方法 将普通HepG2细胞分为为3组:正常组、模型组[用100 ng·mL-1肿瘤坏死因子(TNF-α)处理]及实验组(用100 ng·mL+1TNF-α +10 μmol·L-1阿托伐他汀处理),3组同时负荷100 μg·mL-1低密度脂蛋白(LDL),处理时间24h-用油红O染色测定细胞内脂质含量;以荧光定量聚合酶链式反应和免疫印迹法分别检测HepG2细胞脂肪酸合酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)的基因和SREBP1蛋白表达;以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针染色检测HepG2细胞内活性氧化产物(ROS)的含量;以比色法检测HepG2细胞过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)的含量.结果 正常组与模型组SREBP1蛋白灰度值分别为1.01±0.001,1.61±0.34,这2组的SREBP1 mRNA水平分别为1.01±0.16,3.61 ±0.39,这2组的FAS的mRNA水平分别是1.03 ±0.32,1.99±0.36,这2组的ACC的mRNA水平分别是0.95±0.29,2.37±0.52.与正常组相比,模型组的细胞FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(均P <0.05).与模型组相比,实验组的HepG2FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白灰度值分别是2.95±0.92,3.99 ±1.16,2.85 ±0.91,2.94 ±0.65,实验组的HepG2 FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05).表明在炎症状态下,阿托伐他汀进一步加重了HepG2细胞内脂质的沉积.正常组、模型组与实验组的细胞ROS含量(以荧光强度代表)分别为1.00 ±0.20,1.77±0.25,3.20±0.53;正常组、模型组与实验组的H2 O2含量分别为(2.30±0.31),(4.32±0.77),(5.31±0.75) nmol·mg-1;这2组的MDA含量分别为(0.78±0.22),(1.86±0.23),(3.43±1.15)nmol·mg-1,与正常组比较,模型组差异均有统计学意义(均P <0.05);与模型组比较,实验组差异均有统计学意义(均P <0.05).结论 在炎症状态下,阿托伐他汀诱导HepG2细胞氧化应激,激活SREBP1/FAS/ACC通路,加重细胞内脂质积聚.