巨噬细胞对内皮细胞凋亡的影响及通心络的干预作用

• 作者: 刘玉金 常丽萍 李红蓉 梁俊清 秘红英 魏聪
• 来源期刊: 中国实验方剂学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 动脉粥样硬化 巨噬细胞 极化 内皮细胞 通心络
• 年，卷（期）: 2017,（13）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 121-127
• 页数: 7页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.2017130121

摘要

目的:研究不同亚型巨噬细胞对内皮细胞凋亡的影响及通心络的干预作用,并探讨其可能的作用机制.方法:以THP-1细胞为研究对象,实验分为5组,分别为空白组,佛波酯(PMA)组,M2组,M1组及通心络组.采用PMA(5μg·L-1)分别联合白细胞介素(IL)4(100 μg·L-1),脂多糖(LPS,200 μg·L-)诱导THP-1细胞分别向M2和M1型巨噬细胞极化并给以通心络(300 mg,L-1)进行干预,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测其标志分子IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),IL-6的表达.取巨噬细胞培养上清作为条件培养基培养内皮细胞,采用流式细胞仪检测内皮细胞凋亡率、蛋白免疫印迹方法检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达.结果:与空白组比较,M2组细胞培养上清中IL-10水平显著升高(P＜0.01);M1组细胞培养上清中IL-10水平显著降低,IL-6及TNF-α水平显著升高(P＜0.01);与M1组比较,通心络组细胞培养上清中IL-10水平升高,IL-6及TNF-α水平下降(P＜0.01).与M2组内皮细胞比较,M1型巨噬细胞细胞培养的内皮细胞凋亡率显著升高(P＜0.01),促凋亡蛋白Caspase-3,Bax蛋白的表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达显著降低(P＜0.01);与M1组比较,通心络组内皮细胞的凋亡率显著降低(P＜0.01),促凋亡蛋白Caspase-3,B ax蛋白的表达明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达显著升高(P＜0.01).结论:通心络可以抑制巨噬细胞向M1型极化.M2型巨噬细胞培养上清对内皮细胞的凋亡无明显影响,M1型巨噬细胞培养上清可以促进内皮细胞凋亡;通心络预培养的M1型巨噬细胞培养上清培养的内皮细胞凋亡率显著下降.