miRNA靶向调控CCR7抑制结肠癌细胞增殖及侵袭的研究

• 作者: 曾浩涛 林汉利 王晓玲 陈小欢
• 来源期刊: 国际医药卫生导报
• 关键词: CCR7基因 结肠癌 miRNA 双荧光素酶报告系统
• 年，卷（期）: 2017,（24）
• 所属期刊栏目: 科研课题
• 页码范围: 3832-3835,3839
• 页数: 5页
• 字数: 2901字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-1245.2017.24.004

摘要

目的 探讨miRNA在调控趋化因子受体CCR7表达及对结肠癌细胞增殖及侵袭的影响.方法 利用生物信息学网站Target Scan、Pictar和miRanda,综合文献寻找与CCR7基因相互作用的miRNA,综合3个数据库和文献的结果选取5条miRNA分别为miR-let7、miR-21、miR-98、miR-145、miR-642研究.使用PCR方法扩增含CCR7基因3’-UTR区序列插入到双酶切的双荧光素酶报告载体中,使用lipofectamine2000转染试剂将报告载体和待筛选miRNA共转染293细胞,双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性.用迁移和transwell小室实验检测所预测的miRNA对结肠癌HCT116细胞转移和侵袭能力的影响.用Western blotting检测miRNA作用于结肠癌HCT116细胞后对CCR7蛋白表达的调控.结果 得到含CCR7基因3’-UTR序列的双荧光素酶报告重组质粒,并用凝胶电泳和基因测序的方法验证.CCR7基因3’-UTR上有miRNA的调控作用靶点;双荧光素酶报告显示miR-let7、miR-21组比空白对照组CCR7基因3’-UTR双荧光素酶基因报告载体的荧光素酶活性下降.miR-let7、miR-21能显著抑制结肠癌HCT116细胞迁移和侵袭能力,并且下调CCR7蛋白在HCT116细胞中的表达.结论 CCR7基因3’-UTR段双荧光素酶基因报告载体构建成功,miRNA(miR-let7和miR-21)对CCR7有负调控作用.miR-let7和miR-21能抑制CCR7蛋白的表达,并抑制结肠癌细胞转移和侵袭能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓玲	中山大学附属第八医院消化内科	9	127	4.0	9.0
2	林汉利	中山大学附属第八医院消化内科	3	47	2.0	3.0
3	陈小欢	中山大学附属第八医院消化内科	4	6	2.0	2.0