SENP1基因沉默的人Ⅱ型肺泡上皮细胞系构建

• 作者: 康兰 张婵 李清平 董文斌 赵帅 赵许 雷小平
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 小泛素相关修饰蛋白质类 人Ⅱ型肺泡上皮细胞 基因沉默 RNA 干扰
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: R722.19
• 字数: 3435字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2017.03.005

摘要

目的：构建稳定沉默 SUMO 特异性蛋白酶1（SENP1）基因的人Ⅱ型肺泡上皮细胞系 HEPApiC。方法构建沉默 SENP1基因的 LV3-SENP1-RNAi 慢病毒载体。将 HEPApiC 细胞分为实验组、对照组、空载组，实验组感染LV3-SENP1-RNAi，空载组感染空载体，对照组不做特殊处理；感染72 h 后观察绿色荧光强度，采用 qRT-PCR 检测HEPApiC 细胞中的 SENP1 mRNA，采用 Western blotting 法检测 SENP1蛋白。结果经酶切鉴定及测序分析，成功构建 LV3-SENP1-RNAi 慢病毒载体质粒，包装后得到高滴度的病毒颗粒。感染 LV3-SENP1-RNAi 的 HEPApiC 细胞中 GFP 表达随时间延长逐渐增强，说明 LV3-SENP1-RNAi 成功感染 HEPApiC 细胞。实验组、对照组、空载组细胞中SENP1 mRNA 相对表达量分别为0．026、0．050、0．057，SENP1蛋白相对表达量分别为0．161±0．015、0．781±0．046、0．811±0．008；实验组 SENP1 mRNA 及蛋白相对表达量降低，与对照组及空载组相比，P 均＜0．05。结论成功构建了稳定沉默 SENP1基因的 HEPApiC 细胞系。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董文斌		40	142	7.0	10.0
2	赵帅		7	18	3.0	4.0
3	雷小平		23	62	4.0	7.0
4	康兰		12	28	4.0	5.0
5	李清平		10	33	4.0	5.0
6	张婵		3	7	1.0	2.0
7	赵许		1	1	1.0	1.0