LncRNA-Braveheart促进骨髓间充质干细胞在体外向心肌样细胞分化

• 作者: 伍权华 侯婧瑛 吴浩 周长青 汪蕾 王彤 郑韶欣 郭天柱 钟婷婷 龙会宝
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 骨髓间充质干细胞 长链非编码RNA-Braveheart 心肌样细胞 心肌梗死 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（29）
• 所属期刊栏目: 骨髓干细胞
• 页码范围: 4593-4599
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7416字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.29.001

摘要

背景:课题组前期研究发现骨髓间充质干细胞移植能够改善大鼠心肌梗死后心功能,但整体效果并不太理想,骨髓间充质干细胞在体内局部梗死微环境中的分化效率低下,其向心肌细胞分化的能力极其有限.目的:采用IncRNA-Bvht体外转染骨髓间充质干细胞,观察其对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响.方法:构建含IncRNA-Bvht的病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1-lncRNA-Bvht,对骨髓间充质干细胞进行IncRNA-Bvht转染并检测转染效率.分离培养C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞,并将第3代细胞分为3组:骨髓间充质干细胞组、空载体组和IncRNA-Bvht组.各组细胞培养48 h后用5-氮杂胞苷进行诱导分化24 h再进行正常培养2周,荧光显微镜观察骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化情况,免疫荧光染色、Western blot、qRT-PCR检测心肌分化标记物肌钙蛋白T和肌节蛋白的表达.结果与结论:①诱导分化后细胞形态发生改变,细胞之间形成连接,排列方向趋于一致;②免疫荧光检测结果显示IncRNA-Bvht组肌钙蛋白T和肌节蛋白表达呈现强阳性;肌钙蛋白T阳性细胞的比例显著增加;③qRT-PCR和Western blot检测结果显示IncRNA-Bvht组肌钙蛋白T和肌节蛋白的表达较空载体组和骨髓间充质干细胞组均明显升高(P＜0.01);④结果提示,IncRNA-Bvht转染能够有效促进骨髓间充质l细胞在体外向心肌样细胞发生分化.