乳鼠心肌细胞可成片生长的分离和培养方法

• 作者: 吴超 彭江 田建伟 胡丹 陈鹏 黄绍代
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 乳鼠 心肌细胞 原代培养 成片生长 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（24）
• 所属期刊栏目: 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 3875-3880
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 6498字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.24.018

摘要

背景:传统方法培养的心肌细胞活力、纯度仍不高,细胞多呈簇状生长,细胞与细胞之间的联系较少,细胞多呈单个搏动.目的:改进传统的乳鼠心肌细胞培养方法,获得纯度高、成片生长的心肌细胞.方法:运用0.1%胰蛋白酶4℃过夜消化心肌组织后加入Ⅱ型胶原酶重复消化,二次差速贴壁分离法联合化学抑制剂纯化心肌细胞.倒置相差显微镜下动态观察心肌细胞形态变化,培养48 h后用抗心肌肌钙蛋白T抗体鉴定心肌细胞纯度,连续10 d隔日记录心肌细胞的搏动频率.结果与结论:①心肌细胞在24 h内贴壁,72 h后成簇状分布,5-7 d细胞连接成片生长;②细胞存活率为96%,免疫荧光鉴定心肌细胞纯度97%以上,连续10 d内心肌细胞搏动频率差异无显著性意义(P>0.05);③综上,通过这种改进的培养方式获得成片生长的心肌细胞纯度、活力更高,是一种更为有效的乳鼠心肌细胞培养方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭江	解放军总医院全军骨科研究所	78	456	12.0	17.0
2	田建伟		6	15	3.0	3.0
6	陈鹏		5	5	1.0	2.0
7	吴超		2	8	2.0	2.0
8	黄绍代		1	4	1.0	1.0
17	胡丹		1	4	1.0	1.0