基于ICS技术的NK细胞ADCC效应评价方法建立及应用

• 作者: 吕琳婷 李渊韬 沈弢 谢喆 马尔马尔·托乎塔尔别克
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: NK细胞 ADCC效应 HIV HCV CD107a IFN-γ
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 字数: 4831字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2018.01.001

摘要

目的 探究细胞因子的胞内染色(intracellular cytokine staining,ICS)技术是否可以评价自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)的抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应(antibody-depend-ent cellular cytotoxicity,ADCC)以及在HCV、HIV单独感染和HCV/HIV合并感染情况下ADCC效应的变化.方法 采用流式细胞术分析NK细胞的频数、表面受体的表达;ImageStreamX MarkⅡ流式成像技术鉴定CD56brightNK细胞和CD56dimNK细胞表面CD3/CD56/CD32/CD16的单细胞表达状态;通过P815细胞抗原抗体复合物模型(P815+Ab)以及细胞内因子染色技术评价NK细胞的脱颗粒能力以及细胞因子释放能力;通过流式检测细胞内因子表达和靶细胞杀伤比较HIV、HCV、HIV/HCV慢性感染与健康对照者的NK细胞介导ADCC效应的差异.结果 本研究证实,NK细胞介导ADCC,CD107a+和干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)细胞频数与CD16平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)降低呈正相关;CD56dimNK细胞高表达CD16且CD107a+和IFN-γ+细胞比例较CD56brightNK高;利用ICS法检测NK细胞CD107a和IFN-γ的表达与快速荧光法检测靶细胞裂解率呈正相关;慢性HIV感染时,NK细胞介导ADCC效应受损.结论 研究表明ICS技术可以评价NK细胞的ADCC效应.在HCV、HIV和HIV/HCV慢性感染时,NK细胞介导的ADCC效应减弱.