微量全血法高通量彗星试验方法的研究与应用

• 作者: 戴宇飞 李红丽 段化伟 牛勇 王庆荣 翟庆峰 贾效伟 邱玉刚 郑玉新
• 来源期刊: 工业卫生与职业病
• 学科: 医学
• 关键词: 彗星实验 微量全血 高通量 柴油机尾气(DEE) DNA损伤
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-17
• 页数: 5页
• 分类号: R331
• 语种: 中文
• DOI: 10.13692/j.cnki.gywsyzyb.2018.01.003

摘要

目的 建立一种简易快捷,适合大样本人群生物监测的微量全血法高通量彗星试验技术方法.方法 选择1名不吸烟男性,探索微量全血法的彗星试验条件,建立了微量全血法的高通量彗星试验方法.并在柴油机尾气(diesel engine exhaust,DEE)暴露人群中进行验证.结果 经过对铺胶量和细胞上样量的探索,发现30μl细胞悬液能够均匀铺设到彗星玻片的小孔中,胶片表面比较平整,细胞基本为单层,经裂解液处理后也不易脱落.上样量中发现5μ1抗凝全血与200μl琼脂糖凝胶混合,细胞分散均匀,间距适当,电泳后无细胞重叠,图像清晰容易分辨,对比度较高.在方法学的验证中,高通量彗星试验的结果显示,在DEE暴露组较对照组的彗星尾长、尾矩和尾部DNA百分含量均明显增加,板间及板内变异度小于10％.结论 全血法高通量彗星实验适用于化学致癌物和污染物遗传损伤的检测.