原代小鼠卵巢上皮细胞TP53基因敲除及其生物学特征变化

• 作者: 孙兆增 张涛 曾林 李丹 李文龙 范君文 贺喜兵 邱业峰
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: CRISPR/Cas9 TP53 基因敲除 小鼠卵巢上皮细胞
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 64-69
• 页数: 6页
• 分类号: Q789
• 字数: 3835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6179.2018.03.012

摘要

目的 利用CRISPR/Cas9慢病毒载体系统建立小鼠原代卵巢上皮细胞TP53基因稳定敲除细胞系,分析细胞增殖、细胞周期、克隆形成以及细胞转移侵袭能力的变化.方法 构建LentiCRISPRv2-sgRNA TP53基因敲除质粒,用293FT细胞进行慢病毒包装,转导小鼠原代卵巢上皮细胞,嘌呤霉素筛选出稳定敲除细胞系,进行PCR、蛋白免疫印迹以及免疫荧光鉴定.细胞增殖、细胞周期变化、克隆形成、细胞迁移侵袭能力分别用MTT、流式细胞分析、单层培养以及Transwell小室进行测定.结果 TP53基因敲除小鼠原代卵巢上皮细胞中P53表达缺失;TP53敲除引起细胞迅速增殖,DNA合成加速,克隆形成以及迁移侵袭能力增强.结论 获得了原代小鼠卵巢上皮细胞TP53基因稳定敲除细胞系,细胞生物学特征明显改变.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李丹	军事医学研究院实验动物中心	4	40	2.0	4.0
2	曾林	军事医学研究院实验动物中心	57	237	9.0	10.0
3	张涛	军事医学研究院实验动物中心	16	58	5.0	6.0
4	范君文	军事医学研究院实验动物中心	7	2	1.0	1.0
5	孙兆增	军事医学研究院实验动物中心	27	83	6.0	8.0
6	邱业峰	军事医学研究院实验动物中心	9	21	2.0	4.0
7	李文龙	军事医学研究院实验动物中心	8	33	3.0	5.0
8	贺喜兵	军事医学研究院实验动物中心	3	0	0.0	0.0