SV40 T基因转化的山羊乳腺上皮细胞系及其生物学特性

• 作者: 孙怀昌 宋红芹 王宝安 许益民
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猴病毒40,T基因 山羊,乳房 上皮细胞 生物学特性
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 203-207
• 页数: 5页
• 分类号: Q344.13
• 字数: 3812字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2003.04.003

摘要

目的建立能用于乳腺特异表达基因构件质量检验的山羊乳腺上皮细胞系.方法根据已发表的SV40病毒T基因序列设计引物,以整合有SV40 DNA早期基因区的COS-1细胞基因组DNA为模板,用高保真PCR扩增SV40 T基因.将获得的SV40 T基因克隆入真核表达载体,并用获得的重组表达质粒转染山羊原代乳腺上皮细胞.经有限稀释和反复传代后获得转化细胞克隆,对其生物学特性进行研究.结果扩增出序列正确的SV40T基因,重组质粒转染获得的转化细胞的对数生长期为接种后第4天,细胞群体倍增时间为23.5*!h,克隆形成率为26.7%.DNA斑点杂交试验证明转化细胞的基因组中整合有SV40 T基因,染色体核型分析试验表明转化细胞的核型无明显异常,裸鼠接种试验证明转化细胞不能形成肿瘤,软琼脂集落形成试验表明转化细胞在软琼脂中不能生长.部分细胞克隆已在体外传30代以上,保持正常乳腺上皮细胞的形态特征,在胶原基质上能形成腺泡样结构.结论本研究获得的SV40 T基因转化的山羊乳腺上皮细胞具有转化细胞系的生物学特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许益民	扬州大学畜牧兽医学院动物医学系	42	216	10.0	14.0
2	孙怀昌	扬州大学畜牧兽医学院动物医学系	138	1042	15.0	25.0
3	宋红芹	扬州大学畜牧兽医学院动物医学系	23	156	7.0	11.0
4	王宝安	扬州大学畜牧兽医学院动物医学系	26	272	11.0	16.0