LINE1-ORF1p过表达对肾母细胞瘤细胞WT_CLS1增殖的影响

• 作者: 唐美玲 常会波 曹丁丁 李媛媛 肖萍 邹继珍
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 关键词: LINE1-ORF1p 抗体 肾母细胞瘤 WT_CLS1细胞
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 论著·实验研究
• 页码范围: 501-507
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7499/j.issn.1008-8830.2018.06.014

摘要

目的 制备LINE1-ORF1p多克隆抗体,研究LINE1-ORF1p过表达对肾母细胞瘤细胞WT_CLS1增殖的影响.方法 利用基因工程方法原核表达LINE1-ORF1p,免疫家兔制备多克隆抗体.间接ELISA法检测抗体效价,通过Western blot及免疫组化方法检测抗体对LINE1-ORF1p的特异性识别能力.构建真核表达载体pEGFP-N1-LINE1-ORF1,转染WT_CLS1细胞,通过Western blot和qRT-PCR检测LINE1-ORF1蛋白和基因的表达情况,采用细胞增殖实验和平板克隆形成实验检测LINE1-ORF1p对WT_CLS1细胞增殖及肿瘤细胞克隆形成的影响.结果 制备的LINE1-ORF1p抗体效价>1:16000,能对细胞及肿瘤组织内LINE1-ORF1p特异识别.转染pEGFP-N1-LINE1-ORF1的WT_CLS1细胞,其LINE1-ORF1的mRNA及蛋白水平显著增高(P<0.05),细胞增殖能力和克隆形成能力都显著增强(P<0.05).结论 LINE1-ORF1p可以促进肾母细胞瘤细胞的生长和肿瘤细胞克隆形成,可能参与肾母细胞瘤的发病机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹继珍	首都儿科研究所病理科	59	243	8.0	12.0
2	李媛媛	首都儿科研究所生化免疫科	22	134	5.0	11.0
3	肖萍	首都儿科研究所病理科	15	18	3.0	3.0
4	常会波	首都儿科研究所生化免疫科	17	90	5.0	9.0
5	唐美玲	首都儿科研究所生化免疫科	3	1	1.0	1.0
6	曹丁丁	首都儿科研究所生化免疫科	4	6	1.0	2.0