油菜黑胫病抗性相关基因BnWRKY70的功能研究

• 作者: 宋培玲 李子钦 燕孟娇 皇甫九茹 皇甫海燕 石嵘 贾晓清 郝丽芬
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 油菜 黑胫病 病毒诱导的基因沉默(VIGS) BnWRKY70基因
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 土肥植保
• 页码范围: 127-133
• 页数: 7页
• 分类号: S565.4
• 字数: 4813字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7505/j.issn.1007-9084.2018.01.016

摘要

WRKY转录因子是植物信号传导过程中的重要成员,在植物抗病过程中发挥着重要作用.为了解Bn-WRKY70在油菜黑胫病抗性反应中的作用机理,本研究对油菜响应黑胫病菌侵染产生的特异基因BnWRKY70进行序列分析;将克隆得到BnWRKY70基因CDS 308bp特异区段,利用烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)载体构建了基于病毒诱导的油菜基因沉默体系;利用qRT-PCR验证目的基因的表达水平;最后进一步通过表型观察和病情指数统计分析评价BnWRKY70基因沉默植株在接种黑胫病菌之后油菜的抗病性.结果表明,BnWRKY70基因最长ORF为858bp,编码285个氨基酸,含有一个WRKY保守结构域,属于Ⅲ类WRKY转录因子.BnWRKY70基因沉默后的表达量显著下降,说明在油菜中成功构建了VIGS体系.表型观察发现基因沉默油菜株系叶片比未沉默株系更易感病,病斑面积更大,且病情指数显著高于对照,说明BnWRKY70基因沉默减弱了油菜的抗病性.本研究为揭示BnWRKY70在油菜病原菌分子互作机制中的作用奠定基础.