尼罗罗非鱼主要组织相容性复合体Ⅱβ(M HCⅡβ)基因的克隆、表达和多态性

• 作者: 何佳男 刘晓春 林浩然 罗文娜
• 来源期刊: 中山大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 尼罗罗非鱼 MHCⅡβ 组织分布 多态性
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 页码范围: 7-20
• 页数: 14页
• 分类号: Q17
• 字数: 8026字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13471/j.cnki.acta.snus.2018.01.002

摘要

MHCⅡβ基因在鱼类免疫反应中起重要作用.采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)技术,克隆了尼罗罗非鱼的MHCⅡβ基因.MHCⅡβ基因含有5个外显子和4个内含子,其cDNA全长为1142 bp,开放读码框为750 bp,编码249个氨基酸.通过同源性分析和进化树分析发现,与其他硬骨鱼类和哺乳类的相似性在30.6%~78.6%,和鲈形目的鱼类同源性最高.从25尾罗非鱼的50个开放读码框的阳性克隆中共获得10条不同的核苷酸序列,分别编码不同的氨基酸.氨基酸序列比对分析发现,多态性位点主要集中在MHCⅡβ基因的第2外显子上.通过对海豚链球菌感染后易感个体和抗病个体的PCR-SSCP电泳分析,发现电泳条带出现2~12条不同的单带,测序结果表明个体存在1~6个等位基因,暗示至少存在3个MHCⅡβ基因座.qPCR检测表明,MHCⅡβ基因在鳃、心脏、脾脏等组织高度表达,在肾脏、肌肉、脑等组织中中度表达,而在皮肤、肠、肝脏等组织中表达最弱.在攻毒后的头肾组织中,MHCⅡβ基因的表达量呈现下降-上升-下降的变化趋势,表明MHCⅡβ参与了罗非鱼的免疫反应.