内质网应激因子NAC089突变体的创建及其对病毒侵染胁迫的响应

• 作者: 何青云 吴元华 李方方 杨金广 焦裕冰 申莉莉 秦元霞
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转录因子NAC089 CRISPR/Cas9 病毒侵染 内质网应激
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 509-517
• 页数: 9页
• 分类号: S432.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000222

摘要

有研究表明烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)或黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)侵染烟草能够激活转录因子NbNAC089,从ER膜移至细胞核.为进一步阐释内质网应激因子NbNAC089对病毒侵染胁迫的响应机制,利用CRISPR/Cas9技术构建敲除载体,经烟草遗传转染获得NbNAC089基因突变植株.植株接种病毒后采用qRT-PCR检测病毒CP基因和寄主UPR基因的表达.结果表明:CRISPR/Cas9系统定点敲除NbNAC089基因后,目的基因靶位点序列有碱基的置换与缺失.正常生长条件下,转基因植株与野生型无差异.植株接种TMV-GFP后24～ 96 h,突变体中UPR基因(BiP、bZIP28、bZIP60)的表达量显著高于野生型;接种TMV-GFP后2～6d突变体中病毒的积累量和扩展速度显著高于野生型.表明NbNAC089为UPR的抑制因子,对病毒增殖具有负调控作用.