利用RNAi分析松材线虫ncr基因功能

• 作者: 潘丽梅 王殿东 陈国华
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 松材线虫 灰葡萄孢菌 RNAi ncr基因
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 518-526
• 页数: 9页
• 分类号: S731.52
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000176

摘要

由松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)侵染引起的松材线虫病是松属植物的重要病害之一,其繁殖和传播速度快,防治困难.RNAi技术是目前研究植物寄生线虫基因功能的重要手段.本文利用农杆菌介导灰葡萄孢菌表达松材线虫ncr基因的dsRNA (PDH-RH-NCR),并连续多代喂饲松材线虫使ncr基因表达稳定下调后分析其表型.结果表明,在转有PDH-RH-NCR的灰葡萄孢菌上连续培养10代的松材线虫,ncr基因表达量显著下调13倍.ncr基因表达下调后,线虫发育缓慢,繁殖力也显著降低;处理4d后发育成成虫的百分率为61.75％,显著低于PDH-RH-sGFP(89.75％)和空载体(88.75％)处理;而9d的繁殖量则较PDH-RH-sGFP和空载体处理分别少2 314和2 347条.松材线虫ncr基因表达下调后,4龄幼虫平均寿命(20.9 d)和体内脂肪量(1.340 nmol)则显著高于PDH-RH-sGFP(15.5 d,0.336 nmol)和空载体(15.2 d,0.323 nmol)处理.通过喂饲法RNAi发现松材线虫ncr基因可能与松材线虫的发育速度、繁殖量、寿命、脂肪积累等表型相关.