摘要:
目的 探讨转化生长因子β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)趋化骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)修复大鼠肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)的可能机制.方法 制作大鼠缺血再灌注肾损伤匀浆,与BMSCs共培养.分为4组:BMSCs组、匀浆组、TGF-β1中和抗体组和CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)中和抗体组.免疫荧光染色与激光共聚焦显微镜检测BMSCs表面CXCR4受体表达;体外跨膜趋化实验观察BMSCs向基质细胞衍生因子1(stromal cells derived factor-1,SDF-1)的迁移能力;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time-polymerase chain reaction,qPCR)法检测SDF-1α、CXCR4、TGF-β1 mRNA表达.结果 BMSCs表面CXCR4受体低水平表达,匀浆组CXCR4表达明显增强,增强的表达可被TGF-β1抗体和CXCR4抗体所抑制.匀浆组BMSCs迁移细胞数[(38.92±6.79)个/cm2]明显增加,显著高于BMSCs组[(18.47±5.02)个/cm2]、TGF-β1中和抗体组[(13.26±4.03)个/cm2]、CXCR4中和抗体组[(7.03±2.14)个/cm2],3组分别与匀浆组比较差异具有统计学意义(t分别为12.94,15.33,21.86,P<0.01).匀浆组SDF-1 αmRNA表达为(1.92±0.36),TGF-β1中和抗体组(1.71±0.28),CXCR4中和抗体组(1.66±0.29),3组间SDF-1 αmRNA表达比较差异无统计学意义(F=3.16,P>0.05).匀浆组CXCR4 mRNA表达(3.44±0.62)显著上调,显著高于BMSCs组(1.36±0.57)、TGF-β1中和抗体组(1.82±0.48)、CXCR4中和抗体组(1.15±0.51),3组分别与匀浆组比较差异具有统计学意义(t分别为8.72,10.93,13.27,P<0.01).匀浆组TGF-β1 mRNA(2.91±0.72)表达显著上调,明显高于TGF-β1中和抗体组(0.52±0.21),组间比较差异具有统计学意义(t=18.35,P<0.01),但CXCR4中和抗体组(2.77±0.83)与匀浆组比较差异无统计学意义(t=0.52,P>0.05).结论 缺血再灌注肾损伤促进TGF-β1分泌,高表达的TGF-β1通过提高BMSCs表面CXCR4受体表达诱导BMSCs迁移修复大鼠肾IRI.