hIGF-1基因改良修饰人脐血间充质细胞的研究

• 作者: 孙一 张海宁 李大伟
• 来源期刊: 中华老年骨科与康复电子杂志
• 关键词: 胰岛素样生长因子1 脂质体 间充质干细胞 基因转染
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 346-351
• 页数: 6页
• 字数: 4554字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2096-0263.2018.06.006

摘要

目的 研究hIGF-1基因改良修饰人脐血间充质干细胞的方法,为关节软骨组织工程修复提供良好的种子细胞.方法 综合应用密度梯度离心法和细胞贴壁法分离培养人脐血间充质干细胞,流式细胞仪进行细胞鉴定.通过X-tremen HP介导将含hIGF-1基因全长的真核表达载体pIRES2-EGFP-hIGF-I转染人脐血间充质干细胞,倒置荧光显微镜检测转染后荧光蛋白的表达,计算转染效率,ELISA检测转染后细胞上清液中hIGF-1的含量变化,免疫荧光与RT-PCR检测hIGF-1在细胞中的表达,免疫组化检测Ⅱ型胶原表达.结果 人脐血间充质干细胞表面表达CD105(99.93％)、CD90(99.85％)、CD146(73.63％),不表达Anti-HLA-DR(1.38％)、CD45(0.13％)、CD34(0.11％).hIGF-1基因可在X-tre-men HP介导下转染人脐血间充质干细胞,48 h转染效率为(29±8)％.转染后48 h分泌的hIGF-1最多,为(34.89±0.38)ng/ml,且与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01).转染后细胞可检测到hIGF-1 mRNA、蛋白以及Ⅱ型胶原表达.结论 hIGF-1基因可通过X-tremen HP介导改良修饰人脐血间充质干细胞,促进hIGF-1和Ⅱ型胶原的表达与分泌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张海宁	青岛大学附属医院关节外科	70	224	8.0	11.0
2	孙一	青岛大学附属医院关节外科	12	7	2.0	2.0
3	李大伟	青岛大学附属医院关节外科	3	1	1.0	1.0