猪Beclin1基因调控伪狂犬病病毒诱导细胞自噬和凋亡的机制分析

• 作者: 刘正飞 南良康 张敏 张淑君 李帅峰 杨了寒 王凯 胡林 许苏童
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: PRV 细胞自噬 细胞凋亡 Beclin1
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 1274-1281
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.1|S852.3
• 字数: 6077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.06.020

摘要

旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)感染后细胞自噬和凋亡情况,进一步分析鉴定 PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白.利用免疫印迹(WB)方法检测PRV感染细胞的自噬水平;利用流式细胞术探讨凋亡水平;最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感染 PK-15细胞中Beclin1与Bcl-2和Bcl-xL的结合水平.结果显示,PRV感染导致LC3-Ⅱ的表达明显增多,而P62显著下降,且AKT(S473)磷酸化水平显著减少;其次,PRV感染诱导细胞凋亡且显著上调剪切型Caspase-9/8的表达水平;最后,免疫共沉淀结果显示PRV感染条件下Beclin1能与Bcl-2和Bcl-xL结合,但结合的水平明显降低.PRV感染诱导的细胞自噬可能依赖于 PI3K-Ⅰ/AKT 信号通路,PRV感染可能同时激活了线粒体凋亡途经和死亡受体途经从而诱导细胞凋亡,而PRV感染诱导的细胞自噬和细胞凋亡可能通过抑制Beclin1和Bcl-2 、Bcl-xL结合而相互关联.