慢病毒介导的RNA干扰沉默RRS1基因对乳腺癌细胞MCF-7生物学行为的影响

• 作者: 侯琳 华亚男 宋金莲 李海峰 许军婷
• 来源期刊: 精准医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RRS1基因 乳腺肿瘤 RNA干扰 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 75-80
• 页数: 6页
• 分类号: R737.9
• 字数: 5113字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13362/j.jpmed.201801022

摘要

目的 探讨慢病毒介导的RNA干扰技术抑制RRS1表达对人乳腺癌细胞MCF-7生物学行为的影响.方法 采用Western blot方法检测RRS1在MCF-7与正常乳腺上皮细胞HMEC中的表达;分别构建携带绿色荧光蛋白的shRNA-RRS1慢病毒和阴性对照慢病毒RNA干扰系统,分别感染MCF-7细胞,即得到shRRS1实验组和shCtrl阴性对照组MCF-7细胞;采用荧光定量PCR和Western blot方法分别检测两组细胞的mRNA及蛋白表达,确定敲减效率;采用MTT法连续6d检测两组细胞增殖活力;采用PI染色流式细胞术检测两组细胞的细胞周期分布;采用DAPI荧光染色、Annexin V-APC单染流式细胞术及Caspase 3/7实验检测两组细胞凋亡情况;采用Transwell实验检测两组细胞迁移能力的变化.结果 实验组中RRS1的表达明显高于HMEC(P＜0.05);与对照组相比,实验组RRS1 mRNA和蛋白水平均明显降低(P＜0.05),细胞活力显著减弱(P＜0.05),G1期细胞明显增加(P＜0.05),且实验组细胞发生典型的凋亡形态学改变,凋亡率显著增高(P＜0.05),细胞迁移能力显著降低(P＜0.05).结论 RRS1在乳腺癌细胞MCF-7中高表达.敲减RRS1基因能明显诱导乳腺癌细胞凋亡及周期阻滞,同时使得细胞迁移能力明显降低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯琳	青岛大学医学院生物化学与分子生物学系	64	421	9.0	19.0
2	李海峰	青岛大学医学院生物化学与分子生物学系	89	222	7.0	10.0
3	华亚男	青岛大学医学院生物化学与分子生物学系	4	1	1.0	1.0
4	宋金莲	青岛大学医学院生物化学与分子生物学系	6	21	2.0	4.0
5	许军婷	青岛大学医学院生物化学与分子生物学系	1	1	1.0	1.0