Wip1基因重组慢病毒表达载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的影响研究

• 作者: 孙国贵 张浩 李娟 李宗涛 顾笑梅
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: Wip1 乳腺肿瘤 细胞凋亡 基因转染
• 年，卷（期）: 2017,（33）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4609-4612
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3933字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2017.33.001

摘要

目的 构建Wip1基因重组慢病毒表达载体,研究其对乳腺癌细胞生物学行为的影响.方法 以慢病毒感染方法将Wip 1的短发夹状RNA(shRNA)转入乳腺癌MCF-7细胞.采用qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测转染前后细胞Wip1 mRNA、蛋白的表达,MTT法、流式细胞术及Transwell侵袭实验检测Wip1-shRNA对MCF-7细胞增殖、凋亡、周期及侵袭转移的影响.筛选具有抑制p53基因表达的干扰RNA分子p53dsRNA,并分析其干扰后对乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移的影响.结果 转染48 h后,Wip1-shRNA组细胞荧光较强,NC-shRNA组较弱.Wip1-shRNA组细胞Wip1 mRNA和蛋白的表达分别为0.291±0.025、0.203±0.021与NC-shRN A组0.954±0.090、0.963±0.092比较,差异有统计学意义(P<0.05).两组各时间点细胞存活率比较,差异有统计学意义(P<0.05).NC-shRNA组早期与晚期细胞的凋亡数少于Wip1-shRNA组,差异有统计学意义(P<0.05).NC-shRNA组细胞G0+G1期、S期细胞数分别为53.5±3.6、27.3±1.5,Wip1-shRNA组分别为72.3±5.2、14.6±0.8,差异有统计学意义(P<0.05).Transwell侵袭转移结果表明,NC-shRNA组细胞的穿膜数均多于Wip1-shRNA组(P<0.05).对照组细胞中p53 mRNA的表达、细胞侵袭转移的穿膜数与p53dsRNA组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 RNA干扰可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞Wip1表达,Wip1可能通过调控蛋白表达影响乳腺癌细胞增殖、凋亡、周期与侵袭转移,p53dsRNA干扰p53基因下调后增加乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宗涛	河北省唐山市工人医院乳腺外科	10	50	3.0	7.0
2	顾笑梅	河北省唐山市妇幼保健院妇产科	16	54	4.0	7.0
3	孙国贵	河北省唐山市人民医院放化疗科	14	46	4.0	6.0
4	李娟	河北省唐山市妇幼保健院妇产科	21	15	3.0	3.0
5	张浩	河北省唐山市妇幼保健院妇产科	7	38	3.0	6.0