苯并[α]芘对人支气管上皮细胞CYP1A1、GSTP1和GSTM1 DNA甲基化水平和mRNA表达的影响

• 作者: 刘爱香 张志红 张红梅 曹晶晶 李新 李欢 梁瑞峰 郝忠锁
• 来源期刊: 环境与职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: 苯并[α]芘 人支气管上皮细胞 细胞增殖 DNA甲基化 mRNA表达
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 专栏:苯并[a]芘的毒性效应
• 页码范围: 330-335
• 页数: 6页
• 分类号: R114
• 语种: 中文
• DOI: 10.13213/j.cnki.jeom.2018.17680

摘要

[目的]探讨苯并[α]芘(BaP)对人支气管上皮(16HBE)细胞中CYP1A1、GSTP1和GSTM1启动子区DNA甲基化水平和mRNA表达的影响,为BaP毒理学机制的研究提供科学基础.[方法]体外培养16HBE细胞,取对数生长期的同一批次细胞,随机分为4组,包括1个溶剂对照组和3个BaP处理组,分别用二甲基亚砜(DMSO)及1、2、5mmol/L BaP处理24h,于倒置显微镜下观察细胞的形态学改变.采用CCK-8试剂盒测定细胞增殖能力,甲基化特异性PCR法检测CYP1A1、GSTP1和GSTM1启动子区DNA甲基化水平,实时定量PCR技术检测CYP1A1、GSTP1和GSTM1 mRNA表达的改变.采用SPSS 22.0软件的单因素方差分析进行比较,LSD法进行多组间的两两比较.[结果]与溶剂对照组相比,1、2、5 mmol/L BaP处理组新生细胞数目明显增多,细胞增殖率增高,分别为(100.00±0.47)％、(125.22±0.72)％、(122.92±1.47)％、(128.44±5.97)％(P＜0.05).3个BaP组CYP1A1启动子区甲基化水平分别为8.451±1.234、8.532±0.728、11.064±0.423,低于溶剂对照组(13.917±1.094)(P＜0.05).3个BaP处理组GSTP1启动子区甲基化水平分别为4.276±0.839、3.691±0.748、2.121±0.336,也低于溶剂对照组(10.860±1.129)(P＜ 0.05).GSTM1启动子区甲基化水平分别为34.693±6.603、48.407±7.824、49.803±2.516;其中,1mmol/L BaP组低于溶剂对照组(40.062±7.746),2、5mmol/L BaP组高于溶剂对照组(均P＜0.05).3个BaP组CYP1A1 mRNA表达水平分别为0.009±0.001、0.009±0.001、0.017±0.003,低于溶剂对照组(1.067±0.064)(P＜0.05);GSTP1 mRNA和GSTM1 mRNA的表达水平分别为(0.179±0.074、0.167±0.048、0.143±0.029)和(0.547±0.181、0.518±0.141、0.297±0.044),均低于溶剂对照组(0.829±0.116、0.975±0.183)(P＜ 0.05).[结论] BaP对16HBE的毒作用机制可能与其细胞增殖能力增强及CYP1A1和GSTP1启动子区DNA甲基化水平降低,CYP1A1、GSTP1、GSTM1 mRNA表达降低有关.