肝细胞生长因子对转化生长因子-β1诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生及转分化的抑制作用

• 作者: 李东豪 王泳 陈静
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: Tenon囊/细胞学 成纤维细胞/代谢 肝细胞生长因子/应用及剂量 转化生长因子β1 纤维化/预防和控制 α-平滑肌肌动蛋白 人 培养细胞
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 925-930
• 页数: 6页
• 字数: 5015字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095.0160.2018.12.007

摘要

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生和转分化的影响.方法 人Tenon囊成纤维细胞进行常规培养后分为空白对照组、TGF-β1处理组及不同质量浓度HGF+TGF-β1组.TGF-β1处理组在细胞培养液中添加10 μg/L TGF-β1,不同质量浓度HGF+TGF-β1组在细胞培养液中分别添加10 μg/L TGF-β1,然后分别添加不同质量浓度的HGF(25、50、100、200 μg/L),采用甲基偶氮四唑(MTT)法检测波长560 nm处各组细胞的吸光度(A560);然后选用100 μg/L的HGF进行干预,采用细胞免疫荧光染色技术检测人Tenon囊成纤维细胞中0-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达分布;采用Western blot法检测细胞中α-SMA蛋白的相对表达量. 结果 体外培养的人Tenon囊成纤维细胞呈长梭形,边界清楚,细胞中波形蛋白表达阳性并定位于细胞质.MTT检测显示空白对照组、TGF-β1处理组及HGF25μg/L +TGF-β1组、HGF50μg/L+TGF-β1组、HGF100μg/L+TGF-β1组、HGF200μg/L+TGF-β1组细胞的增生值分别为0.203±0.025、0.497±0.101、0.426±0.062、0.354±0.040、0.272±0.084和0.241±0.011,组间比较差异有统计学意义(F=9.210,P=0.003),TGF-β1处理组细胞增生值明显高于空白对照组,不同质量浓度HGF+TGF-β1组细胞增生值均明显低于TGF-β1处理组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).免疫荧光染色结果显示空白对照组细胞中未见α-SMA的表达,TGF-β1处理组及HGF100μg/L+TGF-β1组细胞的胞质中均可见α-SMA的表达,呈红色荧光,HGF100μg/L+TGF-β1组细胞中α-SMA表达荧光减弱,α-SMA表达细胞明显减少.TGF-β1处理组和HGF100μg/L+TGF-β1组细胞中α-SMA染色阳性细胞百分比分别为(60.0±4.7)％和(14.3±3.1)％,差异有统计学意义(t=19.856,P＜0.001).Western blot检测显示空白对照组、TGF-β1处理组和HGF100μg/L+TGF-β1组细胞中α-SMA蛋白相对表达量分别为0.642±0.032、1.330±0.069和0.884±0.040,总体比较差异有统计学意义(F=13.370,P＜0.001),其中TGF-β1处理组细胞中α-SMA蛋白相对表达量明显高于空白对照组,HGF100μg/L+TGF-β1组细胞中α-SMA蛋白相对表达量明显低于TGF-β1处理组,差异均有统计学意义(均P＜0.05). 结论 HGF抑制TGF-β1诱导的人Tenon囊成纤维细胞的过度增生,下调细胞中α-SMA蛋白的表达,阻止成纤维细胞的表型转化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李东豪	广州医科大学附属第三医院眼科	13	87	4.0	9.0
2	王泳	广州医科大学附属第三医院眼科	3	0	0.0	0.0
3	陈静	广州医科大学附属第三医院眼科	1	0	0.0	0.0