环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调控转化生长因子β1对人根尖牙乳头干细胞分化的作用

• 作者: 权家苗 李颂 郭雨晴 顾雪凝
• 来源期刊: 口腔疾病防治
• 学科: 医学
• 关键词: 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白 转化生长因子β1 根尖牙乳头干细胞 成牙本质细胞 分化 矿化 Runt相关基因2
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 428-433
• 页数: 6页
• 分类号: R781
• 字数: 4782字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12016/j.issn.2096-1456.2018.07.004

摘要

目的 观察过表达第二信使环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-responsive element-binding protein,CREB)调控转化生长因子 β1(transforming growth factor-beta,TGF-β1)对人根尖牙乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)分化的作用.方法 通过采用酶消化法培养hSCAPs,实验分成4组:①Control组,即正常矿化诱导液(α-MEM、10%FBS、10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50μg/ml维生素C、10 nmol/L地塞米松);②TGF-β1组,加入正常矿化诱导液后,加入5μg/mL TGF-β1;③TGF-β1+LV-empty组,除正常矿化诱导液外,加入转染空病毒载体和TGF-β1,TGF-β1浓度为5μg/mL;④TGF-β1+ov-CREB组,除正常矿化诱导液外,加入转染过表达CREB病毒载体和TGF-β1,TGF-β1浓度为5μg/mL.矿化培养2周后,通过茜素红染色观察各组矿化结节形成情况,实时荧光定量PCR法检测各组矿化相关基因,Runt相关基因2(runt-related tran-scription factor 2,RUNX2)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和碱性磷酸酶(alkaline phospha-tase,ALP)mRNA的表达.结果 TGF-β1作用SCAPs后,与Control组(1.12±0.11)相比,抑制矿化结节的形成(0.67±0.12)(P<0.05);下调矿化基因RUNX2(0.60±0.03)、DSPP(0.43±0.12)、ALP(0.69±0.05)的mRNA表达(P<0.05).过表达CREB后逆转TGF-β1对SCAPs分化的抑制作用,与TGF-β1组相比,促进矿化结节的形成(1.27±0.10)(P<0.01)并上调RUNX2(1.33±0.07)、DSPP(1.32±0.11)和ALP(1.26±0.03)mRNA的表达(P<0.05).结论 过表达转录因子CREB能够逆转TGF-β1对hSCAPs分化的抑制作用,促进其分化.