沙冬青端粒酶逆转录酶基因(AmTERT)克隆及表达分析

• 作者: 于婷乔 卢存福 孙丽春 孙玉萍 杨颖 王瑾瑜 门璟煜 陈玉珍 高海波
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 沙冬青 端粒酶 AmTERT 非生物胁迫
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1088-1100
• 页数: 13页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2018.07.0381

摘要

利用分段克隆法从沙冬青中得到一条全长为3 459 bp的端粒酶逆转录酶基因(telomerase reverse transcriptase of Ammopiptanthus mongolicus,AmTERT),并对AmTERT进行了系统的生物信息学分析.结果表明,AmTERT编码1 153个氨基酸,蛋白相对分子质量为132.52 kDa,等电点为9.49,属于稳定性较差的亲水性蛋白.未发现跨膜结构存在,定位预测结果显示其在细胞质膜及线粒体上有定位,同时发现其有单分型(NLS-monopartite)和双分型(NLS-bipartite)细胞核定位信号,而在原生质体中的瞬时表达实验结果表明AmTERT定位在细胞核中.该氨基酸序列共有147个潜在磷酸化位点,氨基酸比对结果显示,AmTERT与大豆TERT相似性高达75％.另外,AmTERT蛋白具有端粒酶逆转录酶的保守功能结构域(TRBD及RT),并存在潜在的Akt激酶磷酸化位点,暗示其可能通过磷酸化作用发挥调节自身或其他基因功能的作用.荧光定量PCR结果显示,AmTERT在根中表达量较茎和叶组织都高,盐、干旱、热及低温胁迫均能导致沙冬青幼苗根和叶中AmTERT的表达量升高,说明植物细胞端粒酶可能和动物细胞一样具有应激保护功能.综上,研究结果表明,沙冬青端粒酶可能存在非端粒功能.