人端粒酶逆转录酶基因启动子区的克隆及其真核表达载体的构建

• 作者: 姜国忠 李杰 王建民 薛乐勋 郭玉忠
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 人端粒酶逆转录酶 启动子 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 系列研究
• 页码范围: 44-47
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 2575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2004.01.014

摘要

目的:构建人端粒酶逆转录酶基因启动子区的真核表达载体.方法:用核酸内切酶Not I和Kpn I酶切报告基因GFP,插入pcDNA3.1(+)载体,得到pcDNA3.1(+)-GFP(PG)载体;用PCR方法扩增hTERT基因ATG上游的启动子序列,测序后用核酸内切酶BglⅡ和Kpn I酶切插入PG载体,得到pcDNA3.1(+)-GFP-hTERT(PGT)载体.将PGT载体转染人食管癌EC9706细胞系,经G418筛选,荧光显微镜下观察.结果:克隆得到的启动子序列与文献相符,重组载体经酶切鉴定方向正确,含有人端粒酶逆转录酶基因启动子序列.经转染人食管癌EC9706细胞系,在荧光显微镜下观察到绿色的阳性克隆.结论:克隆的人端粒酶逆转录酶基因启动子序列在真核细胞中具有启动子活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李杰	郑州大学细胞生物学研究室	210	1092	15.0	21.0
2	薛乐勋	郑州大学细胞生物学研究室	140	1187	18.0	26.0
3	王建民	郑州大学细胞生物学研究室	28	223	10.0	13.0
4	姜国忠	郑州大学细胞生物学研究室	35	208	8.0	13.0
5	郭玉忠	郑州大学细胞生物学研究室	42	156	8.0	10.0