人端粒酶逆转录酶与热休克蛋白70融合表达载体的构建及原核表达

• 作者: 刘丰 唐鹿群 张蕾 束永前 苏川 郭人花
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 热休克蛋白70 人端粒酶逆转录酶 融合基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 肿瘤学研究
• 页码范围: 825-828
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2478字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2007.08.013

摘要

目的:构建热休克蛋白70(HSP70)与人端粒酶逆转录酶融合表达载体,在大肠杆菌进行表达.方法:利用PCR方法扩增hTERT基因片段(532aa～637aa),双酶切后插入原核表达载体pET32a的Nco Ⅰ和EcoR Ⅰ位点之间,形成pET32a-hTERT质粒.通过PCR方法扩增人HSP70全长cDNA.双酶切后插入pET32a-hTERT的EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ位点之间,构建hTERT与HSP70的N端融合基因原核表达质粒pET32a-hTERT-HSP70.含有该质粒的大肠杆菌BL21经异丙醛-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.结果:成功的扩增了HSP70基因与hTERT基因片段;测序结果表明成功的构建了pET32a-hTERT-HSP70原核表达载体.含有该质粒的大肠杆菌BL21经诱导后表达约110 kD的蛋白.结论:HSP70与人端粒酶逆转录酶融合表达质粒构建成功,并成功获得了融合蛋白hTERT-HSP70.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏川	南京医科大学江苏省现代病原生物学重点实验室	57	260	9.0	13.0
2	束永前	南京医科大学第一附属医院肿瘤科	152	833	14.0	18.0
3	郭人花	南京医科大学第一附属医院肿瘤科	33	163	7.0	10.0
4	刘丰	南京医科大学江苏省现代病原生物学重点实验室	18	57	4.0	6.0
5	唐鹿群	南京医科大学第一附属医院肿瘤科	10	62	4.0	7.0
6	张蕾	南京医科大学江苏省现代病原生物学重点实验室	32	122	7.0	9.0