表达BG4蛋白对人胃癌AGS细胞凋亡和端粒酶逆转录酶表达的影响

• 作者: 于波 师帅帅 张慧鹏 张毅强 李云飞 王星宇 胡文庆 裴晋红 郑军
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: G-四链体 BG4 端粒酶逆转录酶 细胞凋亡 胃癌
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 2090-2095
• 页数: 6页
• 分类号: R735.2|R363.2
• 字数: 4106字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.11.027

摘要

目的:构建G-四链体抗体BG4基因的真核表达载体pEGFP-N1-BG4,探讨转染该真核表达载体致BG4蛋白过表达对人胃癌细胞株AGS凋亡和端粒酶逆转录酶表达的影响.方法:以BG4基因原核表达载体pSANG10-BG4为模板,PCR扩增出含有BG4基因的目的片段,经TA克隆与pMD18-T载体连接,测序正确后,经Sac I和Pst I双酶切,与真核表达载体pEGFP-N1连接后转化感受态大肠杆菌DH5α,并进行酶切分析和序列测定,Western blot鉴定BG4蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期;DAPI法及HE染色检测各组细胞凋亡;qPCR和West-ern blot检测空白对照组、pEGFP-N1组和pEGFP-N1-BG4组端粒酶逆转录酶mRNA和蛋白表达的变化.结果:酶切分析显示,目的基因条带与预期结果相符,DNA测序表明克隆的BG4基因序列正确,Western blot结果表明转染pEGFP-N1-BG4质粒可以成功表达BG4蛋白.转染pEGFP-N1-BG4质粒可抑制细胞进入S期.DAPI法及HE染色显示,pEGFP-N1-BG4组出现明显的新月形核和核固缩的细胞凋亡现象.qPCR和Western blot结果表明,pEGFP-N1-BG4组端粒酶逆转录酶表达受到抑制.结论:用pEGFP-N1-BG4真核表达载体转染胃癌细胞株AGS可以抑制该细胞端粒酶逆转录酶表达,诱导细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑军	长治医学院生化教研室	14	68	3.0	8.0
2	师帅帅	长治医学院附属和济医院肾内科	18	40	4.0	5.0
3	张毅强	长治医学院生化教研室	29	52	5.0	5.0
4	裴晋红	长治医学院生化教研室	18	20	2.0	4.0
5	王星宇	长治医学院临床一系	2	0	0.0	0.0
6	张慧鹏	长治医学院附属和济医院普外科	3	4	1.0	2.0
7	李云飞	长治医学院临床一系	1	0	0.0	0.0
8	于波	长治医学院临床一系	1	0	0.0	0.0