CysLTR1蛋白羧基端核定位序列及其刺激剂和拮抗剂对CysLTR1核转位的影响

• 作者: 张玉霞 翟志芳 郝飞 钟华 韦应波
• 来源期刊: 中国皮肤性病学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 角质形成细胞 半胱氨酰白三烯受体1 核定位序列 核转位
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 396-400
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13735/j.cjdv.1001-7089.201710112

摘要

目的 研究半胱氨酰白三烯受体1(CysLTR1)蛋白的羧基端核定位序列以及CYSLTR1刺激剂和拮抗剂对其核转位过程的影响.方法 首先构建CysLTR1野生型重组质粒pEGFP-C 1/CYSLTR1WT、含NLS序列的重组质粒pEGFP-C1/NLS及其突变型重组质粒pEGFP-C 1/CYSLTR1-dNLS和pEGFP-C 1/CYSLTR1-rNLS,转染人角质形成细胞后,通过激光共聚焦显微镜观察转染后24h、48h、72h时,以及分别加入CysLTR1刺激剂LTD4或其选择性拮抗剂MK571后CysLTR1的核转位情况.结果 pEGFP-C1/CYSLTR1WT和pEGFP-C 1/NLS在细胞核内的荧光强度增加与转染时间呈正相关,其细胞核内荧光强度占细胞内总荧光强度的比率与pEGFP-C1/CYSLTR1-dNLS和pEGFP-C 1/CYSLTR1-rNLS转染组比较差异有统计学意义(P均＜0.05);加入刺激剂LTD4后,也得到同样结果;加入选择性拮抗剂MK571后,pEGFP-C 1/CYSLTR1 WT在细胞核内的荧光强度无明显变化,其细胞核内荧光强度占细胞内总荧光强度的比率与pEGFP-C1/NLS、pEGFP-C1/CYSLTR1-dNLS和pEGFP-C 1/CYSLTR1-rNLS转染组比较差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 CysLTR1中的羧基端序列RKHSLSSVTYVPRKK是一个重要的核转位序列,在CysLTR1刺激剂LTI4可促进CysLTR1发生核转位,其选择性拮抗剂MK571可阻断其发生核转位.