人前列腺癌PC-3细胞系中肿瘤干细胞的富集、鉴定以及生物学特征的初步研究

• 作者: 于得水 冯宁翰 冯杨焜 包文平 吴岩 徐新宇 汪洋 董坚
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 肿瘤干细胞 新生血管化 肿瘤侵润
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-29
• 页数: 10页
• 分类号: R737.25
• 字数: 7974字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2018.02.004

摘要

目的 从人前列腺癌PC-3细胞系中分离、富集并鉴定前列腺癌干细胞,探讨具有肿瘤干细胞特性的侧群(SP)细胞与未分选的总体细胞(NST)之间的生物学行为差异.方法 采用无血清培养液(SFM)悬浮细胞聚球法体外培养PC-3 细胞系.以PC-3悬浮成球细胞为实验组,常规以含血清培养液(SSM)中单层贴壁培养的PC-3细胞为对照组,通过流式细胞技术检测两种细胞中CD44+、CD133+细胞及SP细胞比例.通过生物学功能实验比较两种细胞的增殖、血管生成、迁移、侵袭能力的差异.结果 PC-3成球细胞可以在SFM中生存并形成悬浮细胞球.PC-3悬浮成球细胞具有自我更新和分化能力,在体外可以连续、稳定传代,在SFM中滴加血清后可以分化,交替培养于SSM和SFM中可以实现与贴壁细胞之间的相互转化.PC-3悬浮成球细胞中CD44+、CD133+细胞及SP细胞比例均显著高于常规培养的PC-3贴壁细胞(P<0.05).相对于NST细胞,SP细胞具有更强的迁移、侵袭和血管生成能力,而SP细胞增殖能力则相对较弱.RT-qPCR和Western blot实验发现SP细胞中缺氧诱导因子2α(HIF-2α)、血管生成因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMP)基因和蛋白水平均高于NST细胞.结论 PC-3悬浮成球细胞具有肿瘤干细胞特性,采用无血清悬浮细胞聚球培养法可以从PC-3 细胞系中简便、高效地富集前列腺癌干细胞.从人前列腺癌PC3细胞系分离出的SP细胞的血管生成、迁移、侵袭能力均强于NST细胞,而增殖能力却弱于NST细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯宁翰	南京医科大学附属无锡第二医院泌尿外科	33	128	7.0	10.0
2	汪洋	南京医科大学附属无锡第二医院泌尿外科	22	40	4.0	5.0
3	吴岩	南京医科大学附属无锡第二医院泌尿外科	13	34	4.0	5.0
4	董坚	南京医科大学附属无锡第二医院泌尿外科	14	49	4.0	6.0
5	于得水	南京医科大学附属无锡第二医院泌尿外科	11	40	5.0	5.0
6	徐新宇	南京医科大学附属无锡第二医院泌尿外科	13	31	4.0	5.0
7	冯杨焜		1	2	1.0	1.0
8	包文平		1	2	1.0	1.0