缓激肽对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导视网膜色素上皮细胞发生上皮间充质转化的影响

• 作者: 于靖 何梦梅 张瑞玲 梁秀玮 范佳淇 蔡雯婷 金惠子
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 缓激肽 转化生长因子-β1 视网膜色素上皮细胞 上皮间充质转化
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1005-1009
• 页数: 5页
• 分类号: R774
• 字数: 4643字
• 语种: 中文

摘要

目的 制作增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)细胞模型,研究缓激肽(bradykinin,BK)对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞发生EMT的影响,并探讨BK对PVR的影响机制.方法 体外培养人RPE细胞株ARPE-19细胞,采用不同浓度转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)分别作用于ARPE-19细胞24 h、48 h,于倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用CCK-8检测细胞增殖情况,确定TGF-β1浓度及作用时间;利用Western blot和细胞免疫荧光检测EMT标志蛋白E-钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和波形蛋白(Viminten)表达情况;细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移能力.同时采用Western blot检测TGF/Smad通路下游pSmad3和Smad7的表达.结果 TGF-β1刺激ARPE-19细胞后可以成功诱导EMT体外细胞模型.当TGF-β1浓度为10 μg·L-1、作用时间为48 h时,细胞增殖最明显.BK在TGF-β1诱导的EMT中可以降低α-SMA、Viminten的表达,升高E-钙黏素的表达并且降低细胞迁移能力.这些影响能被BK-2受体拮抗剂HOE-140逆转.TGF-β1诱导ARPE-19细胞发生EMT时,pSmad3表达量升高;TGF-β1刺激前给予BK刺激,pSmad3表达量减少;加入BK前预敷HOE-140,然后给予TGF-β1刺激,BK作用减弱,pSmad3表达量升高.Smad7表达趋势与pSmad3表达趋势相反.结论 10 μg·L-1 TGF-β1可导致ARPE-19细胞发生EMT.BK通过TGF-/Smad信号通路上调Smad 7的表达、下调pSmad 3的表达,从而逆转TGF-β1诱导的EMT.提示BK可能是一种新的、有效的治疗PVR的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁秀玮		3	29	2.0	3.0
2	蔡雯婷	同济大学附属上海市第十人民医院眼科	3	9	2.0	3.0
3	金惠子	同济大学附属上海市第十人民医院眼科	3	27	2.0	3.0
4	张瑞玲	同济大学附属上海市第十人民医院眼科	2	23	1.0	2.0
5	于靖		2	4	1.0	2.0
6	何梦梅	同济大学附属上海市第十人民医院眼科	2	22	1.0	2.0
7	范佳淇	同济大学附属上海市第十人民医院眼科	1	0	0.0	0.0