流式细胞术估测枣染色体倍性和基因组大小方法的建立及应用

• 作者: 刘孟军 刘平 吕晔 王利虎 罗智
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 枣 流式细胞术 倍性鉴定 基因组大小
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 511-520
• 页数: 10页
• 分类号: S665.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.03.017

摘要

流式细胞术广泛应用于植物的染色体倍性鉴定和基因组大小估测.本研究拟建立一套适于枣(iziphus jujuba)的流式细胞术方法,为枣倍性育种和基因组分析提供技术支持.以二倍体临猗梨枣和其同源四倍体辰光为材料,系统比较了细胞裂解液种类、叶片成熟度、叶片保存方式及碘化丙啶(propidium Iodide,PI)染液用量对倍性检测效果的影响.结果表明,Tris-MgCl2裂解液的裂解效果最好,木本植物缓冲液(woody plant buffer,WPB)的裂解效果最差;幼嫩叶片检测效果优于成熟叶片,老化叶片不能产生清晰的主峰;在4℃和-20℃条件下,检测效果随着保存天数的增加而降低,4℃保存1～3 d或-20℃保存3～6个月后检测效果未发生明显变化,4℃保存7d或-20℃保存12个月仍可进行测定;综合考虑成本和检测效果,PI染液适宜用量为30 μL.利用建立的枣流式细胞术倍性检测方法进行倍性检测,确定枣和酸枣亿acidojujuba)三倍体和二倍体的荧光强度比值为1.43～1.60,四倍体和二倍体荧光强度比值为1.70～2.11,六倍体和二倍体荧光强度比值为2.90～3.27.估测出的冬枣(组培苗)基因组大小为449.94+3.60 Mb,与其基因组测序结果误差仅为1.33％;同时估测出了献县酸枣、台南1号毛叶枣(Z.mauritiana)(多倍体)、滇刺枣(野生二倍体毛叶枣)基因组大小分别为404.25±2.33,1 349.73+8.22,462.97+8.72 Mb.本研究建立的利用流式细胞术鉴定枣属植物染色体倍性和估测枣属植物基因组大小的方法,操作简单、准确、省时省力,1人1d内可完成对200余个样品的测定,该方法还适用于梨(Pyrus bretschneideri)、葡萄(Vitis vinifera)、杨树(Populus)和白菜(Brassica rapa)等植物.本研究结果可为枣属植物倍性育种和组学研究提供技术支撑,同时为其他植物提供借鉴参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘孟军	河北农业大学中国枣研究中心	195	3609	34.0	49.0
3	刘平	河北农业大学中国枣研究中心	57	763	17.0	25.0
5	罗智	河北农业大学林学院	4	18	2.0	4.0
9	王利虎	河北农业大学中国枣研究中心	7	30	3.0	5.0
15	吕晔	河北农业大学中国枣研究中心	3	17	2.0	3.0