核糖体工程技术选育米尔贝霉素高产菌株

• 作者: 何林凌 侯燕燕 夏海洋 李晓广 田永强 褚以文 鲁凤娟
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 核糖体工程 复合诱变 链霉素 米尔贝霉素
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 遗传育种与生物合成
• 页码范围: 811-816
• 页数: 6页
• 分类号: R978.1
• 语种: 中文

摘要

本实验室中保存的一株从土壤中分离得到的米尔贝链霉菌(Streptomyces milbemycinicus)27号菌株所产米尔贝霉素A3和A4的初始产量分别为61.0和23.8μg/mL.以该菌株为出发菌株,采用核糖体工程技术,结合紫外诱变技术,对米尔贝霉素产生菌米尔贝链霉菌进行诱变,并以链霉素耐受为筛选压力进行筛选.经过诱变后对单菌落进行摇瓶复筛,其中正突变株中米尔贝霉素产量最高的菌株编号是R2-6-5,其米尔贝霉素A3和A4的产量分别是105.2和38.8μg/mL,较原始菌株分别提高了72.5％和63.3％,且遗传稳定.最后,对产量变化较大的11株突变株基因组中rsmG基因和rspL基因进行突变位点分析,发现在rspL基因内均未发生突变,rsmG基因均发生突变.本研究表明,链霉素抗性降低的突变菌株确实都在相关基因内发生突变,且核糖体工程结合紫外诱变的诱变方式效果良好,能够快速有效的提高米尔贝链霉菌生物合成米尔贝霉素的能力.