lncRNA HIT对骨肉瘤组织和细胞U2OS顺铂抵抗的影响及其机制

• 作者: 任志鹏 康宇翔
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 U2OS细胞 293T细胞 长链非编码RNA HIT 顺铂抵抗 上皮间充质转化
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1296-1302
• 页数: 7页
• 分类号: R730.51|R738.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2018.12.014

摘要

目的:探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HIT与骨肉瘤细胞顺铂(cisplatin,DDP)抵抗的关系及其上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关机制.方法:选择天津医院骨科2017年6月至2018年6月42例骨肉瘤组织及相应癌旁组织(距癌变边缘＞5 cm)标本,采用qRT-qPCR检测骨肉瘤组织及相应癌旁组织中HIT及EMT标志物Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA的表达水平.构建DDP抵抗的入骨肉瘤U2OS细胞株及人肾上腺293T细胞株作为抵抗组及对照组,采用慢病毒转染两组表达靶向HIT的siRNA载体于抵抗组细胞中作为干扰A组及B组,同时转染HIT过表达载体及空白载体构建HIT过表达的U2OS细胞株及空白U2OS细胞株分别作为过表达组及空白组.MTT实验检测各组细胞DDP半抑制浓度(IC50),qRT-PCR实验检测各组细胞中HIT、Snail及E-cadherin mRNA的表达水平,Westem blotting检测各组细胞Snail及E-cadherin的表达水平,RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA-IP)实验检测U2OS及293T细胞中HIT与Snail蛋白分子的结合情况.结果:骨肉瘤组织中HIT及Snail mRNA表达显著高于癌旁组织、E-cadherin mRNA表达显著低于癌旁组织,且骨肉瘤组织中HIT与E-cadherin mRNA表达呈显著负相关(均P＜0.01);抵抗组细胞DDP IC50显著高于对照组、干扰A组及B组细胞,过表达组DDP IC50显著高于空白组(均P＜0.01);抵抗组细胞HIT表达显著高于对照组,干扰A组及B组细胞HIT表达显著低于抵抗组及对照组,过表达组HIT表达显著高于空白组(均P＜0.05或P＜0.01);抵抗组细胞Snail、E-cadherin mRNA表达水平显著高于或低于对照组、干扰A组及干扰B组,过表达组E-cadherin mRNA显著低于空白组;抵抗组细胞Snail蛋白表达水平显著高于对照组、干扰A组及B组细胞,E-cadherin蛋白表达水平则显著低于对照组、干扰A组及B组细胞,过表达组Snail蛋白表达水平显著高于空白组(P＜0.05或P＜0.01);在U2OS及293T细胞中,免疫磁珠介导Anti-snail抗体下拉HIT的表达水平显著高于对照IgG抗体下拉HIT的表达水平(P＜0.0l).结论:HIT通过正调控Snail蛋白水平,抑制E-cadherin的转录活性,从而促进骨肉瘤细胞EMT及DDP抵抗的发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康宇翔	天津市天津医院骨科	4	3	1.0	1.0
2	任志鹏	天津市天津医院骨科	5	10	2.0	3.0