非小细胞肺癌组织中高表达的miR-1269对肺癌细胞A549生物学行为的影响

• 作者: 单保恩 张璁 戴素丽 王耀杰 白函瑜 赵连梅 陈亮 魏思思
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 非小细胞肺癌 A549细胞 miR-1269 FOX01 增殖 周期 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1282-1289
• 页数: 8页
• 分类号: R730.51|R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2018.12.012

摘要

目的:探讨miR-1269在非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达和对人NSCLC A549细胞生物学特性的影响及其作用机制.方法:选取2017年1月至2018年1月在河北医科大学第四医院胸外科进行首次手术切除的34例新鲜NSCLC癌组织及相应的癌旁组织,应用qRT-PCR检测NSCLC癌组织及相应的癌旁组织中miR-1269的表达水平.将miR-1269mimics和mimics NC转染至A549细胞后,应用MTS实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测A549细胞增殖、迁移和侵袭能力,流式细胞术检测其细胞周期的变化.生物信息学软件预测miR-1269的靶基因,并通过Western blotting和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269对靶基因的调控作用.采用Western blotting检测已转染的A549细胞的细胞周期依赖性激酶抑制剂p21、细胞周期蛋白D2以及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白ZEB2和E-cadherin的表达情况.结果:NSCLC癌组织中miR-1269的表达水平显著高于对应的癌旁组织(2.81±2.27 vs 1.61±1.36,P＜0.05).miR-1269 mimics转染组A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著高于空白对照组和mimics NC转染组(均P＜O.O1).转染miR-1269-mimics的A549细胞S期细胞比例明显高于mimics NC转染组[(46.54±1.57)％ vs(23.32±3.15)％,P＜0.01].miR-1269可与FOXO1基因3'端非翻译区的结合位点相结合,且过表达miR-1269后,A549细胞中FOX01向表达水平及荧光素酶报告基因的活性均明显降低(均P＜0.01).miR-1269 mimics转染组A549细胞中p21、E-cadherin蛋白表达水平降低(均P＜0.05),而CyclinD2、ZEB2蛋白表达水平升高(均P＜0.05).结论:miR-1269在NSCLC组织中表达上调,并且能够促进A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力和影响细胞周期进程;其作用机制可能与靶向调控抑癌基因FOXO1的表达有关.