氧化应激致人视网膜血管内皮细胞损伤中microRNA表达谱的改变及生物信息学分析

• 作者: 周慧敏 姜磊 崔冬生 张睿 许顺江 谢冰 韩雪
• 来源期刊: 国际内分泌代谢杂志
• 关键词: 氧化应激 microRNA 人脐静脉内皮细胞 人视网膜血管内皮细胞 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 78-83
• 页数: 6页
• 字数: 4410字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4157.2018.02.002

摘要

目的 检测氧化应激引起人视网膜血管内皮细胞(HMREC)损伤过程中微小RNA(miRNA)表达谱的改变,并探讨这些差异性表达的miRNA在视网膜血管内皮损伤过程中的作用.方法 利用不同浓度的H2 O2溶液孵育人脐静脉内皮细胞(HUVEC)建立氧化应激模型,并用CCK-8细胞增殖实验检测细胞活性.采用基因芯片技术检测氧化应激介导的HUVEC中miRNA表达谱的变化,对差异性表达的miRNA进行生物信息学分析,用实时PCR方法在HMREC中进行验证.结果 CCK-8检测HUVEC活力的结果显示,与同一时间对照组相比,100 μmol/L H2O2干预组8h和16 hHUVEC存活率未发生明显改变(F100μmol/L=3.897,P＞0.05),其他浓度H2O2干预组细胞存活率明显下降(F200μmol/L=8.172、F800μmol/L=239.214,P均＜0.05),且呈剂量和时间依赖性.400 μmol/L干预组24 h细胞存活率下降接近50％(F400μmol/L=6.905,P＜0.05).微阵列分析显示,H2O2(400 μmol/L)孵育HUVEC24 h后,共有116个miRNA的表达发生改变.其中有11个miRNA表达差异在1.5倍以上.生物信息学分析提示,差异表达的miRNA可能参与细胞的代谢调节、AMP活化蛋白激酶(AMPK)信号通路等多个生物学过程.实时PCR检测证实,在经过400 μmol/L H2O2处理24 h后的HUVEC和HMREC的氧化应激模型中,miRNA-15b、miRNA-106b、miRNA-497均显著下调(FmiRNA-15b,HUVEC=9.9、FmiRNA-106b,HUVEC=8.4、FmiRNA-497,HUVEC=63.5、FmiRNA-15b,HMREC=643.7、FmiRNA-106b,HMREC=81.4、FmiRNA-497,HMREC=199.9,P均＜0.05),而miRNA-195、miRNA-638、miRNA-1246、miRNA-4267和miRNA-4734均显著上调(FmiRNA-195,HUVEC=592.1、FmiRNA-638,HUVEC=812、FmiRNA-1246,HUVEC=58.5、FmiRNA-4267,HUVEC=1 179.1、FmiRNA-4734,HUVEC=173、FmiRNA-195,HMREC=67.8、FmiRNA-638,HMREC=103.7、FmiRNA-1246,HMREC=2 078.9、FmiRNA-4267,HMREC=234.6、FmiRNA-4734,HMREC=10.7,P均＜0.05).结论 氧化应激可导致HMREC中多个miRNA表达失衡,这些差异性表达的miRNA可能通过AMPK信号通路,在视网膜血管内皮损伤过程中发挥潜在作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许顺江	河北医科大学第一医院中心实验室	23	87	6.0	8.0
2	崔冬生	河北医科大学第一医院中心实验室	22	83	7.0	8.0
3	周慧敏	河北医科大学第一医院内分泌科	90	604	14.0	19.0
4	张睿	河北医科大学第一医院中心实验室	11	62	5.0	7.0
5	韩雪	河北医科大学第一医院内分泌科	20	218	9.0	14.0
6	谢冰	河北医科大学第一医院中心实验室	5	10	2.0	3.0
7	姜磊	河北医科大学第一医院中心实验室	1	0	0.0	0.0