变形链球菌耐氟菌株gtfB基因失活菌株的构建

• 作者: 张志民 张志鹰 张红 李文月 李贺 武玉凤 王春萌 超博 高爽
• 来源期刊: 口腔医学研究
• 关键词: 变形链球菌耐氟菌株 gtfB基因 重叠延伸聚合酶链反应 同源重组 基因失活
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 口腔微生物学研究
• 页码范围: 490-494
• 页数: 5页
• 字数: 3945字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2018.05.008

摘要

目的:构建变形链球菌 (S.mutans) 耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株, 为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础.方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段, 以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重叠延伸聚合酶链反应法 (overlap extension polymerase chain reaction, OE-PCR) 获取上述3个片段的同源重组片段;与pEASY-Blunt Cloning Vector连接形成重组质粒后, 进行PCR鉴定和测序鉴定;将重组片段电转化入UA159-FR感受态细胞中得到gtfB基因失活菌株, 并进行PCR鉴定.结果:经PCR鉴定和测序鉴定, 含有gtfB基因重组片段的重组质粒构建成功;经PCR鉴定, UA159-FR的gtfB基因失活株构建成功.结论:成功构建了含有gtfB基因重组片段的重组质粒和S.mutans耐氟菌株UA159-FR的gtfB基因失活株, 可用于gtfB基因功能的研究.