Sonic hedgehog信号通路参与脂多糖诱导肺微血管内皮细胞表达RACK1

• 作者: 尤青海 牛成成 王巾枚 蒋利娟 贾丹
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: 脂多糖 肺微血管内皮细胞 活化的蛋白激酶C受体1 Sonic hedgehog信号通路 急性呼吸窘迫综合征
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 急性呼吸窘迫综合征
• 页码范围: 757-763
• 页数: 7页
• 字数: 3903字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2018.07.010

摘要

目的 探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是否影响大鼠肺微血管内皮细胞(rat puhnonary microvascular endothelial cells,RPMVEC)表达活化的蛋白激酶C受体1(protein kinase C receptor 1,RACK1)及Sonic hedgehog(SHH)信号通路对其表达的影响.方法 取健康雄性、体质量100～120 g、SPF级SD大鼠,于安徽医科大学第一附属医院呼吸内科实验室,体外培养RPMVEC,免疫细胞化学法检测RACK1蛋白在RPMVEC表达,随机分为:LPS和SAG干预实验:(1)LPS量效组,0.1、1、10 mg/L LPS与RPMVEC孵育8 h;LPS时效组,10 mg/L LPS与RPMVEC孵育0、2、4、8、12、24h.(2)SAG量效组,0.1、1、10μmol/L RPMVEC孵育8 h;SAG时效组,1 μ mol/L SAG与RPMVEC孵育0、2、4、8、12、24h.(3) LPS+SAG干预组,10 mg/L LPS预孵育1h后加入1μmol/L SAG继续孵育8 h;设空白组、LPS组和SAG组为对照.所有干预结束后Western blot法检测RACK1蛋白表达及RT-PCR法检测GLI-1 mRNA表达,多组变量间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用f检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 免疫细胞化学染色法显示RPMVEC表达RACK1.(1)LPS量效组(0、0.1、1、10 mg/L):RACK1蛋白表达量随LPS浓度增加而升高,组间比较:P＜0.05;GLI-1 mRNA表达量为(1.109±0.063)、(1.039±0.135)、(0.813±0.066)、(0.770±0.105),1 mg/L组与10 mg/L组比较P＞0.05,其余组间比较P＜0.05;LPS时效组:LPS作用RPMVEC诱导RACK1蛋白自2h表达上调(0.370±0.010),12h达最高(1.296±0.048),组间比较差异有统计学意义(F=1 272.204,P＜0.05);而GLI-1 mRNA表达自2h开始下调(0.929±0.007),组间比较差异有统计学意义(F=306.609,P＜0.05).(2) SAG量效组(0、0.1、1、10μmol/L):RACK1蛋白表达量未见明显变化,组间比较P＞0.05,GLI-1 mRNA表达量为(1.109±0.063)、(1.169±0.052)、(3.468±0.128)、(3.434±0.054),0μmol/L组与0.1μmol/L组比较,1μmol/L组与10μmol/L组比较P＞0.05,其余组间比较P＜0.05.SAG时效组:SAG作用RPMVEC诱导RACK1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);GLI-1 mRNA表达自2h上调(3.027±0.065),组间比较差异有统计学意义(F=132.841,P＜0.05).(3)LPS+SAG干预组:LPS+SAG作用RPMVEC表达RACK1蛋白量较LPS组下调(0.831±0.040 vs.1.189±0.149,P＜0.05),GLI-1 mRNA较LPS组上调(2.720±0.129 vs.0.796±0.082,P＜0.05).结论 RACK1表达增加参与LPS刺激RPMVEC过程,激活的SHH信号通路可下调LPS诱导RACK1表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尤青海	安徽医科大学第一附属医院呼吸内科	55	193	8.0	9.0
2	牛成成	安徽医科大学第一附属医院消毒供应中心	8	36	4.0	6.0
3	蒋利娟	安徽医科大学第一附属医院呼吸内科	5	9	3.0	3.0
4	贾丹	安徽医科大学第一附属医院呼吸内科	6	11	3.0	3.0
5	王巾枚	安徽医科大学第一附属医院呼吸内科	4	6	2.0	2.0