炎性因子对星形胶质细胞的活化及sPLA2-ⅡA表达的机制及影响

• 作者: 李雪粉 李青 王拥军 王群 郭安臣 陈文武
• 来源期刊: 中国卒中杂志
• 关键词: 星形胶质细胞 炎性因子 分泌型磷脂酶A2-ⅡA
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1012-1018
• 页数: 7页
• 字数: 4950字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5765.2018.10.003

摘要

目的 探索在炎性因子作用下,星形胶质细胞的活性变化及其产生的分泌型磷脂酶A2-ⅡA (secretory phospholipase A2 of group ⅡA,sPLA2-ⅡA)表达量的变化,进一步探讨其可能存在的机制.方法 在体外原代培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞的基础上,取第4代培养的细胞用于实验.随机分为对照组和实验组,实验组分别为:10?ng/ml白介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)组,100?ng/ml IL-1β组,10?ng/ml肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)组,100?ng/ml TNF-α组,10?ng/ml IL-1β+10?ng/ml TNF-α组,100?ng/ml IL-1β+100?ng/ml TNF-α组.24?h后用细胞增殖-毒性检测试剂盒检测细胞活力.选取10?ng/ml IL-1β+10?ng/ml TNF-α组继续进行实验.通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和酶联免疫吸附测定,检测sPLA2-ⅡA的表达量变化,并通过qRT-PCR检测核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、NF-κB抑制蛋白激酶α(inhibitor of NF-κB kinase α,IKKα)、NF-κB抑制蛋白激酶β(inhibitor of NF-κB kinase β,IKKβ)的mRNA变化.结果 通过分离、纯化获得了形态典型的大鼠大脑皮质星形胶质细胞,细胞形态不规则,突起较多较长,呈放射状.胶质纤维酸性蛋白免疫染色显示纯度达95%以上.实验组细胞的活性均高于对照组.其中,100?ng/ml IL-1β组、100?ng/ml TNF-α组、10?ng/ml IL-1β+10?ng/ml TNF-α组和100?ng/ml IL-1β+100?ng/ml TNF-α组的细胞活性明显高于对照组(t=0.07、0.12、0.53、0.39,P＜0.05).与对照组相比,10?ng/ml IL-1β+10?ng/ml TNF-α组sPLA2-ⅡA的mRNA和蛋白水平表达量显著升高(t=9.615、11.635,P＜0.05),NF-κB、IKKα、IKKβ的mRNA均增高(t=4.015、4.719、6.509,P＜0.05).结论 炎性因子IL-1β与TNF-α联合应用可刺激星形胶质细胞活化,并能够不同程度地刺激sPLA2-ⅡA的表达,该过程可能与NF-κB通路有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈文武	河南大学第一附属医院神经内科	80	260	10.0	12.0
2	郭安臣	脑血管病转化医学北京市重点实验室北京首都医科大学附属北京天坛医院神经病学中心	6	10	1.0	2.0
3	王拥军	脑血管病转化医学北京市重点实验室北京首都医科大学附属北京天坛医院神经病学中心	43	23	3.0	4.0
4	李青	郑州市第二人民医院神经内科	12	37	4.0	6.0