冷冻保存对人类精子线粒体DNA的影响

• 作者: 傅龙龙 卢文红 周芳 安琪 张开舒 李鸿 梁小薇 王晓尉 童越 袁冬 许剑锋 谷翊群 郭颖
• 来源期刊: 生殖医学杂志
• 关键词: 精子冷冻 生育力保存 线粒体DNA
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1126-1130
• 页数: 5页
• 字数: 3879字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3845.2018.11.015

摘要

目的 探讨常规精液冷冻技术对人类精子线粒体DNA的影响. 方法 收集符合精子库捐精条件的正式志愿者精液样品,将每份样品分为2份:1份进行精液冷冻复苏处理,为实验组;1份新鲜精液,为对照组.采用Markler计数板联合CASA法评估冷冻复苏前后精子活力;两组精液均采用实时荧光定量PCR和长链PCR技术,分别检测精子线粒体DNA的拷贝数和完整性. 结果 共收集22份精液标本,纳入志愿者年龄为(27.8±3.0)岁,禁欲天数(6.1±0.9)d;精液体积(5.0士1.5)ml,精子浓度(75.8±15.8)×106/ml,前向运动精子百分比为(68±6)％,总活动精子复苏率为(72±8)％.冷冻保存后,精子活力显著降低:前向运动精子百分比减少[(49.0±6.5)％ vs.(68.0±6.1)％,P＜0.05),平均路径速率(VAP)[(35.8±6.8)vs.(46.8±9.5),P＜0.05]、直线速率(VSL)[(27.3±3.3)vs.(35.1±8.3),P＜0.05]和曲线速率(VCL)[(57.6士6.9)vs.(91.8士10.2),P＜0.05]较前下降.与新鲜精液相比,冷冻复苏后精子的线粒体DNA拷贝数显著增加[(10.12士8.41)vs.(5.66士5.53),P＜0.05],完整性比较无统计学差异[(29.69±15.04)vs.(32.78±16.0),P=0.077].结论 在正式捐精志愿者人群内,常规精液冷冻技术降低精子活力,增加人类精子mtDNA的拷贝数,但未显著改变mtDNA的完整性.