摘要:
目的 研究青蒿琥酯对硼替佐米耐药的骨髓瘤细胞株的细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞凋亡相关蛋白的影响.方法 用硼替佐米浓度梯度递增法处理人骨髓瘤细胞株NCI-H929,建立硼替佐米耐药的NCI-H929细胞株NCI-H929BR.取对数生长期NCI-H929BR细胞,分为对照组(加入RPMI-1640培养液)和低、高2个浓度实验组(25,50 μg·mL-1青蒿琥酯),分别处理48h.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测NCI-H929BR的增殖情况;以流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡变化;以免疫印迹法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白家族(Bcl-2、Bcl-Xl、Bax)的表达.结果 用浓度梯度递增法成功建立了硼替佐米耐药的NCI-H929细胞株NCI-H929BR,其耐药指数为20.12倍.药物处理48 h后,25,50 μg·mL-1实验组的细胞增殖率分别为62.46%,33.48%,2个浓度实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);高浓度实验组与低浓度实验组比较,差异有统计学意义(P<0.05),说明抑制效应呈浓度依赖性.高浓度实验组处理细胞48h,NCI-H929BR细胞的G1期细胞增加,G1期细胞百分比为(51.63±4.02)%;对照组为(34.72±2.43)%,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).高浓度实验组处理细胞24h,早期凋亡细胞百分比为(13.10±1.53)%,对照组为(2.32±1.02)%;晚期凋亡细胞百分比为(10.26±2.42)%,对照组为(1.93±0.69)%,实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P< 0.05).低、高2个浓度实验组能降低Bcl-Xl、Bcl-2蛋白的相对表达量而升高Bax蛋白的表达,低、高2个浓度实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P <0.05);高浓度实验组与低浓度实验组比较,差异有统计学意义(P<0.05),说明药物对蛋白表达的作用呈浓度依赖性.结论 青蒿琥酯可抑制NCI-H929BR的增殖,促进其凋亡,产生G0/G1期阻滞,并下调Bcl-2、Bcl-Xl而上调Bax蛋白的表达.