Caspase-1通过炎症小体激活MPTP诱导的PD小鼠神经炎症反应的相关研究

• 作者: 于凌 孔敏 梁辉
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: NLRP3 Caspase-1 SH-SY5Y细胞 帕金森病
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 427-433
• 页数: 7页
• 字数: 4644字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2018.06.005

摘要

目的 NOD样受体热蛋白结构域3( NLRP3)-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1 (caspase-1)炎症小体在1-甲基,4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠神经损伤中的作用及机制.方法 将小鼠随机分为模型组和对照组,模型组腹腔注射 MPTP 溶液(30 mg·kg-1·d-1),制备PD模型,对照组给予等量生理盐水;爬杆试验和悬挂试验观察小鼠行为学变化;免疫印迹试验(Western blot)检测小鼠中脑组织中炎症小体的含量.将体外培养的人源性神经母细胞SH-SY5Y随机分为对照组、无义组、siRNA NLRP3组、1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)组、siRNA+MPP+组;采用脂质体转染的方法,将siRNA-NLRP3转染至人源性神经母细胞SH-SY5Y中,加入MPP+孵育细胞48 h,体外观察NLRP3炎症小体对神经细胞的保护作用.噻唑蓝法(MTT)检测细胞活力的变化,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western blot检测NLRP3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)的蛋白质水平.结果 与对照组相比,模型组小鼠从木杆顶端爬至底端所耗时间显著增加(P<0. 05),悬挂得分显著降低(P<0. 05),中脑黑质部中NLRP3炎症小体、IL-1β、Pro-IL-1β以及caspase-1的表达量显著增加(P<0. 05).与MPP+组相比,体外转染siRNA-NLRP3的可显著降低 MPP+介导的 SH-SY5Y细胞中NLRP3蛋白的水平(P<0. 05),提高细胞的活力(P<0. 05),抑制其凋亡(P<0. 05),促进Bcl-2蛋白表达(P<0. 05),显著抑制cleaved caspase-3、Bax的蛋白表达.结论 NLRP3-caspase-1炎症小体在PD神经损伤过程中发挥重要作用;体外抑制NLRP3表达可显著增强SH-SY5Y细胞的活力,抑制其凋亡,可能通过调控线粒体凋亡信号通路对神经细胞发挥保护作用,为PD的临床治疗提供新的药物靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔敏	烟台市烟台山医院神经内科	20	76	5.0	8.0
2	梁辉	烟台市烟台山医院神经内科	32	254	9.0	15.0
3	于凌	烟台市烟台山医院神经内科	6	38	2.0	6.0